十全大补汤通过调节NK细胞功能抑制结肠癌术后转移的实验研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cdelphiboy
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目的:  本课题基于中医理论知识,通过动物实验及现代实验室技术,探讨手术切除结肠癌原发瘤对转移瘤及免疫功能的影响,观察补益剂代表方十全大补汤及其组方四君子汤对原发瘤切除后转移瘤的影响,研究十全大补汤、四君子汤对血清细胞因子、NK细胞的作用,从免疫学的角度探索十全大补汤及四君子汤抑制结肠癌术后肿瘤转移、生长的作用机制。  方法:  1.构建结肠癌皮下转移、肝转移两种动物模型,利用卡钳法、动物活体成像技术、HE染色法探讨十全大补汤及四君子汤对术后转移瘤的影响;  2.采用酶联免疫吸附试验检测术后小鼠血清中TNF-α、IL-2、IFN-γ三种细胞因子水平的变化,以及十全大补汤、四君子汤对这三种细胞因子的影响;  3.采用流式细胞技术检测小鼠外周血中表达粘附分子CD49b及活化受体CD335的细胞所占比例;  4.采用免疫组织化学技术分析小鼠脾脏中NK细胞活化受体NKG2D及转移瘤中CD49b的表达情况。  结果:  1.切除原发瘤后,皮下转移瘤体积、瘤重、肝脏转移瘤荧光强度均有不同程度的升高;采用术前给药模式,灌胃十全大补汤、四君子汤,两组均能抑制转移瘤生长(P<0.05),以十全大补汤作用明显;  2.切除原发瘤后,两种动物模型小鼠外周血清中TNF-α水平不同程度的降低,IL-2水平升高;十全大补汤、四君子汤均可显著上调TNF-α、IFN-γ、 IL-2水平(P<0.05),以四君子作用较为明显;  3.切除原发瘤后,两种模型小鼠外周血中CD49b阳性细胞在淋巴细胞中的百分比略有升高,CD335阳性细胞百分比降低;十全大补汤、四君子汤均可上调两种细胞百分比(P<0.05),以十全大补汤作用显著;  4.切除原发瘤后,两种模型转移瘤组织中粘附分子CD49b的表达降低;十全大补汤、四君子汤显著上调CD49表达水平(P<0.05),十全大补汤作用明显;  5.切除原发瘤后,两种模型脾脏中活化受体NKG2D的表达明显降低(P<0.05);十全大补汤、四君子汤显著上调NKG2D表达水平(P<0.05),十全大补汤作用明显。  结论:  1.切除结肠癌原发瘤可促进肿瘤的转移,十全大补汤、四君子汤可抑制术后肿瘤的转移、生长,十全大补汤作用尤为显著  2.十全大补汤、四君子汤可通过上调细胞因子TNF-α、IL-2、IFN-γ增强肿瘤免疫,四君子汤作用较为明显。  3.十全大补汤、四君子汤可通过上调粘附分子(CD49b)和活化受体(CD335、NKG2D)的表达增强NK细胞的活性及粘附力,提高NK细胞的杀伤力,从而抑制结肠癌的转移.
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