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研究背景：脊髓背角中的细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)在疼痛早期活化，参与疼痛的产生和维持，活化后的细胞外信号调节激酶1和2(ERK1/2)通过对下游转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)活性的调控,调节目的基因的表达。脊髓背角神经肽Y(neuropeptide Y, NPY)及其两个受体(Y1R和Y2R)位于脊髓的浅背角，这是伤害性门控和调节的关键区域。此外，NPY及其受体和CREB还可以相互调节。
目的：观察电针(Electroacupuncture ,EA)对急性炎症疼痛模型大鼠脊髓背角中p-ERK1/2、p-CREB、NPY及其受体(Y1R和Y2R)表达的影响，探讨电针“足三里(ST36)+阳陵泉穴(YC)”治疗急性炎症疼痛的作用机制。
方法：将48只雄性大鼠随机分为空白组(Saline组)、模型组(CFA组)、假电针组(CFA+shamEA组)、电针组(CFA+EA组)，每组12只，实验大鼠后足底注射完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant, CFA)建立急性炎性疼痛模型，在造模成功后第1天，开始电针“ST36+YC”频率2Hz、幅度1mA、时间20min、连续波，每天1次，连续治疗7天。于建立炎性疼痛模型前(T0)和建模后第1-7天(T1-T7)时，通过热辐射试验、vonFrey测试检测实验大鼠热痛阈值(TWL)和机械痛阈值(PWTs)的改变。分别于建模后第3天和第7天(T3和T7)，利用免疫组织化学方法检查脊髓背角中NPY、NPY1R及NPY2R表达变化。利用蛋白印迹(Western blot)法检测脊髓背角ERK1/2、p-ERK1/2、CREB、p-CREB、NPY、NPY1R及NPY2R蛋白在脊髓背角中表达。
结果：(1)T1时，实验大鼠足底部注射CFA后其TWL和PWTs明显降低，差异有统计学意义(P<0.001)。与Saline组相比，CFA组、CFA+shamEA组实验大鼠的TWL和PWTs逐渐降低，到T3时，其TWL和PWTs降到最低，差异有统计学意义(P<0.001)，以后逐渐回升；CFA+EA组与其无明显差异。与CFA组相比，CFA+EA组的PWTs前4天存在显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)，T4后明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，但CFA+EA组的TWL持续正常，差异有统计学意义(P<0.001)；CFA+shamEA组与其无明显差异。(2)关于p-ERK1/2、p-CREB：Westernblot法结果显示，T3与T7时各组实验大鼠脊髓背角中ERK1/2和CREB蛋白表达无明显差异。与Saline组相比，T3时CFA组和CFA+shamEA组实验大鼠脊髓背角中p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2、p-CREB/CREB升高，差异有统计学意义(P<0.05)，T7时p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2、p-CREB/CREB明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，CFA+EA组与Saline组在T3与T7时均无明显差异。与CFA组相比，T3时CFA+EA组实验大鼠脊髓背角中p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2和p-CREB/CREB减少，差异有统计学意义(P<0.05)，T7时p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2和p-CREB/CREB明显降低，差异有统计学意义(P<0.01)。(3)关于NPY：免疫组化结果显示，与Saline组比较，T3时CFA组和CFA+shamEA组的脊髓背角中NPY明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，到T7时升高，差异有统计学意义(P<0.05)，T3和T7时CFA+EA组显著升高，其差异有统计学意义(P<0.001)。与CFA组相比，T3时CFA+EA组的脊髓背角中NPY明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，持续至T7时显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)。Westernblot法结果显示，与Saline组比较，T3和T7时CFA组、CFA+shamEA组和CFA+EA组的脊髓背角中NPY显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)。与CFA组相比，T3和T7时CFA+EA组的脊髓背角中NPY显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)。(4)关于Y1R和Y2R：免疫组化结果显示，与Saline组比较，T3时CFA组和CFA+shamEA组的脊髓背角中Y1R和Y2R明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，到T7时显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)，T3时CFA+EA组与其无明显差异，T7时CFA+EA组升高，其差异有统计学意义(P<0.05)。与CFA组相比，T3时CFA+EA组的脊髓背角中Y1R和Y2R有所降低，差异有统计学意义(P<0.05)，持续至T7时差异仍有统计学意义(P<0.05)。Westernblot法结果显示，与Saline组比较，T3和T7时CFA组、CFA+shamEA组的脊髓背角中Y1R显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)；T3和T7时CFA+EA组脊髓背角中Y1R与其比较差异有统计学意义(P<0.001，P<0.01)。与CFA组相比，T3时CFA+EA组的脊髓背角中Y1R显著降低，差异有统计学意义(P<0.001)，持续至T7时CFA+EA组的脊髓背角中Y1R人仍明显降低，差异有统计学意义(P<0.01)。与Saline组比较，T3时CFA组、CFA+shamEA组的脊髓背角中Y2R明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，T7时CFA组、CFA+shamEA组的脊髓背角中Y2R显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)；T3和T7时CFA+EA组脊髓背角中Y2R与其比较差异有统计学意义(P<0.05，P<0.01)。与CFA组相比，T3时CFA+EA组的脊髓背角中Y2R降低，差异有统计学意义(P<0.05)，持续至T7时CFA+EA组的脊髓背角中Y2R仍明显降低，差异有统计学意义(P<0.01)。
结论：(1)电针治疗可以有效缓解CFA炎性疼痛模型大鼠的热痛觉过敏和机械超敏。(2)ERK1/2-CREB信号通路可能参与急性炎性疼痛的形成，电针缓解急性炎性疼痛的机制可能与下调脊髓背角中ERK1/2-CREB信号通路有关。(3)电针可能通过诱导急性炎性疼痛模型大鼠脊髓背角中NPY大量表达、抑制Y1R和Y2R受体表达发挥抗伤害作用。(4)电针可能通过ERK1/2-CREB信号通路调节NPY及其受体的表达。
目的：观察电针(Electroacupuncture ,EA)对急性炎症疼痛模型大鼠脊髓背角中p-ERK1/2、p-CREB、NPY及其受体(Y1R和Y2R)表达的影响，探讨电针“足三里(ST36)+阳陵泉穴(YC)”治疗急性炎症疼痛的作用机制。
方法：将48只雄性大鼠随机分为空白组(Saline组)、模型组(CFA组)、假电针组(CFA+shamEA组)、电针组(CFA+EA组)，每组12只，实验大鼠后足底注射完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant, CFA)建立急性炎性疼痛模型，在造模成功后第1天，开始电针“ST36+YC”频率2Hz、幅度1mA、时间20min、连续波，每天1次，连续治疗7天。于建立炎性疼痛模型前(T0)和建模后第1-7天(T1-T7)时，通过热辐射试验、vonFrey测试检测实验大鼠热痛阈值(TWL)和机械痛阈值(PWTs)的改变。分别于建模后第3天和第7天(T3和T7)，利用免疫组织化学方法检查脊髓背角中NPY、NPY1R及NPY2R表达变化。利用蛋白印迹(Western blot)法检测脊髓背角ERK1/2、p-ERK1/2、CREB、p-CREB、NPY、NPY1R及NPY2R蛋白在脊髓背角中表达。
结果：(1)T1时，实验大鼠足底部注射CFA后其TWL和PWTs明显降低，差异有统计学意义(P<0.001)。与Saline组相比，CFA组、CFA+shamEA组实验大鼠的TWL和PWTs逐渐降低，到T3时，其TWL和PWTs降到最低，差异有统计学意义(P<0.001)，以后逐渐回升；CFA+EA组与其无明显差异。与CFA组相比，CFA+EA组的PWTs前4天存在显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)，T4后明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，但CFA+EA组的TWL持续正常，差异有统计学意义(P<0.001)；CFA+shamEA组与其无明显差异。(2)关于p-ERK1/2、p-CREB：Westernblot法结果显示，T3与T7时各组实验大鼠脊髓背角中ERK1/2和CREB蛋白表达无明显差异。与Saline组相比，T3时CFA组和CFA+shamEA组实验大鼠脊髓背角中p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2、p-CREB/CREB升高，差异有统计学意义(P<0.05)，T7时p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2、p-CREB/CREB明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，CFA+EA组与Saline组在T3与T7时均无明显差异。与CFA组相比，T3时CFA+EA组实验大鼠脊髓背角中p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2和p-CREB/CREB减少，差异有统计学意义(P<0.05)，T7时p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2和p-CREB/CREB明显降低，差异有统计学意义(P<0.01)。(3)关于NPY：免疫组化结果显示，与Saline组比较，T3时CFA组和CFA+shamEA组的脊髓背角中NPY明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，到T7时升高，差异有统计学意义(P<0.05)，T3和T7时CFA+EA组显著升高，其差异有统计学意义(P<0.001)。与CFA组相比，T3时CFA+EA组的脊髓背角中NPY明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，持续至T7时显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)。Westernblot法结果显示，与Saline组比较，T3和T7时CFA组、CFA+shamEA组和CFA+EA组的脊髓背角中NPY显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)。与CFA组相比，T3和T7时CFA+EA组的脊髓背角中NPY显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)。(4)关于Y1R和Y2R：免疫组化结果显示，与Saline组比较，T3时CFA组和CFA+shamEA组的脊髓背角中Y1R和Y2R明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，到T7时显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)，T3时CFA+EA组与其无明显差异，T7时CFA+EA组升高，其差异有统计学意义(P<0.05)。与CFA组相比，T3时CFA+EA组的脊髓背角中Y1R和Y2R有所降低，差异有统计学意义(P<0.05)，持续至T7时差异仍有统计学意义(P<0.05)。Westernblot法结果显示，与Saline组比较，T3和T7时CFA组、CFA+shamEA组的脊髓背角中Y1R显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)；T3和T7时CFA+EA组脊髓背角中Y1R与其比较差异有统计学意义(P<0.001，P<0.01)。与CFA组相比，T3时CFA+EA组的脊髓背角中Y1R显著降低，差异有统计学意义(P<0.001)，持续至T7时CFA+EA组的脊髓背角中Y1R人仍明显降低，差异有统计学意义(P<0.01)。与Saline组比较，T3时CFA组、CFA+shamEA组的脊髓背角中Y2R明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，T7时CFA组、CFA+shamEA组的脊髓背角中Y2R显著升高，差异有统计学意义(P<0.001)；T3和T7时CFA+EA组脊髓背角中Y2R与其比较差异有统计学意义(P<0.05，P<0.01)。与CFA组相比，T3时CFA+EA组的脊髓背角中Y2R降低，差异有统计学意义(P<0.05)，持续至T7时CFA+EA组的脊髓背角中Y2R仍明显降低，差异有统计学意义(P<0.01)。
结论：(1)电针治疗可以有效缓解CFA炎性疼痛模型大鼠的热痛觉过敏和机械超敏。(2)ERK1/2-CREB信号通路可能参与急性炎性疼痛的形成，电针缓解急性炎性疼痛的机制可能与下调脊髓背角中ERK1/2-CREB信号通路有关。(3)电针可能通过诱导急性炎性疼痛模型大鼠脊髓背角中NPY大量表达、抑制Y1R和Y2R受体表达发挥抗伤害作用。(4)电针可能通过ERK1/2-CREB信号通路调节NPY及其受体的表达。