【摘 要】
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目的：探讨人类肝癌的发生是否与螺杆菌有关。 方法：1、取80对新鲜的肝癌及癌旁组织标本，进行螺杆菌培养和组织PCR检测，PCR引物为两对螺杆菌属特异的16S-RNA引物，采用巢式PCR方
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目的：探讨人类肝癌的发生是否与螺杆菌有关。 方法：1、取80对新鲜的肝癌及癌旁组织标本，进行螺杆菌培养和组织PCR检测，PCR引物为两对螺杆菌属特异的16S-RNA引物，采用巢式PCR方法：用细菌16SrRNA的通用引物16SEUbac作PCR第一轮扩增，螺杆菌特异性引物Helicospecies作PCR第二轮扩增。对螺杆菌16SrRNA基因阳性的选取PCR扩增产物较多的50份样品回收后进行测序分析；并用幽门螺杆菌(Hp，H．pylori)的特异基因(26KDa蛋白)和相关功能基因(cagA、vacA、rps4、glmM)来验证是否为该菌；正常肝组织取自3例肝血管瘤标本和10例正常肝组织的新鲜标本；2、以兔抗Hp抗体通过免疫组化技术，检测80对肝癌及癌旁组织标本；3、选取PCR及免疫组化都阳性的标本6份，用透射电镜观察肝癌及癌旁组织标本中是否有幽门螺杆菌存在。 结果：1、未能从组织标本中培养出螺杆菌。2、80份癌组织标本中39份癌组织检出螺杆菌基因，阳性率为48.75％，80份癌旁组织标本中38份癌旁组织检出螺杆菌基因，阳性率为47.5％。50份螺杆菌16SrRNA基因PCR扩增产物较强的标本经测序鉴定，与幽门螺杆菌有99％以上的同源性。正常肝组未检出螺杆菌属基因，阳性率为0.0％，与癌组织和癌旁组织差异有统计学意义(P＜0.01)。25％(20／80)标本癌组织及癌旁组织都阳性；45％(36／80)标本癌组织或者癌旁组织有阳性；30％(24／80)标本癌组织和癌旁组织都阴性。3、50份螺杆菌16SrRNA基因PCR扩增产物较强的标本中有8份cagA基因阳性(16％)；37份26KDa基因阳性(74％)；9份glmM基因阳性(18％)；未能扩增出vacA基因以及rps4基因。4、80份癌组织标本中26份癌组织检出H．pylori，阳性率为32.5％；24份癌旁组织免疫组化检出H．pylori，阳性率为30.0％。正常肝组中未观察到幽门螺杆菌的存在，阳性率为0.0％，与癌组织和癌旁组织差异有统计学意
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