白菜小孢子培养再生植株染色体倍性分子检测技术研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:djmaxha
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
白菜是我国栽培蔬菜中分布最广,栽培面积最大的蔬菜类作物之一。目前,在白菜的育种工作中主要利用游离小孢子培养技术,这种方法能够在1-2年得到纯合的双单倍体植株,但是其培养的再生植株主要是单倍体和二倍体植株的混合群体。长期以来人们主要通过花蕾期观察植株的花器形态来鉴别植株的倍性。这种方法不仅费时,并且不能处理大量植株。研究表明,甲基化是基因组DNA的一种主要的表观遗传修饰方式,在植物中以胞嘧啶甲基化为主。甲基化修饰在基因表达、植物细胞分化以及系统发育中起着重要的调节作用,可以影响植物的花期、育性、花及叶片的形态等。本研究利用了MS-RE PCR法,SRAP标记和MSAP标记,同时结合形态学鉴定法和根尖染色体制片法对白菜小孢子培养的再生植株进行倍性鉴定。获得以下研究结果:1.对小白菜品种(BFS060964)进行游离小孢子培养,最终得到9株再生植株,其中2株单倍体,7株二倍体,自然加倍率77.7%。构建单倍体和二倍体混合池后,利用甲基化敏感性限制性内切酶-PCR法,结合SRAP分子标记技术,对混合池进行筛选,共筛选768对引物组合,得到2对含有多态性的引物组合,利用甲基化敏感性限制性内切酶-PCR法检测结果与根尖染色体制片法鉴定结果一直,表明小白菜小孢子培养获得的再生植株中倍性与基因组DNA甲基化有关,可以利用甲基化敏感性限制性内切酶-PCR法检测小白菜品种(BFS060964)游离小孢子培养再生植株的倍性。2.对小白菜,大白菜,菜心,菜薹等不同品种的白菜类作物进行游离小孢子培养,将单倍体和二倍体再生植株,分别混合构建单倍体和二倍体混合池后,利用甲基化敏感性限制性内切酶-PCR法,结合SRAP分子标记技术,对混合池进行筛选,共筛选1928对引物组合,没有得到含有多态性的引物组合,表明利用甲基化敏感性限制性内切酶-PCR法,结合SRAP分子标记技术的方法不能用于不同品种白菜类作物构建的单倍体和二倍体混合池。3.对小孢子培养获得再生植株的自然加倍率较高的大白菜品种(Z16)进行游离小孢子培养,最终得到17株再生植株,其中3株单倍体,14株二倍体,自然加倍率82.4%。构建单倍体和二倍体混合池后,利用MSAP标记对混合池进行筛选,共筛选64对引物组合,得到2对含有多态性的引物组合,表明此种方法可以用于分析甲基化与白菜小孢子培养获得的再生植株倍性的关系。
其他文献
随着三江平原的开发利用及草地畜牧业的迅速发展,小叶章(Deyeuxia angustifolia)的饲用价值逐渐被人们认识,小叶章草地作为牧业用地的面积逐年扩大。但对低湿草地资源管理及
新课程标准提出:“学生是学习和发展的主体,语文课程必须根据学生身心发展和语文学习的特点,关注学生的个体差异和不同的学习需求,爱护学生的好奇心、求知欲,充分激发学生的
小平同志南巡讲话之后,举国上下反映热烈,许多行业的改革开放明显地向深度和广度拓展。在这一片热潮之中,广播电视该怎么办的问题不能不引起我们深深的思索。广播电视改革的
We study the effects of running coupling and gluon number fluctuations in the latest diffractive deep inelastic scattering data.It is found that the description
期刊
@@
期刊
@@
期刊
@@
The Jeans instabilities in an unmagnetized,collisionless,isotropic self-gravitating matter system are investigated in the context of κ-deformed Kaniadakis dist
期刊
@@
Ordered GeSi nanowires with a ~10nm cross section are fabricated utilizing top-down and Ge condensation techniques.In transmission electron microscopy measuremen
期刊
@@
We investigate the strain in various Ge-on-insulator (GeOI) micro-structures induced by three phase-change materials (PCMs) (Ge2Sb2Te5,Sb2Te3,GeTe) deposited.Th
期刊
@@
期刊
@@