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【目的】分析人舌癌Tca8113细胞加热后不同时间蛋白质表达谱变化,从蛋白组水平初步探讨热杀伤舌癌细胞的机制。[方法]常规培养人舌鳞癌Tca8113细胞,分为6组。取一组为空白对照组,其余5组分别43℃40min水浴法加热处理各组靶细胞,37℃分别孵育2h、6h、8h、12h、24h后收集细胞。提取总蛋白,后进行双向荧光差异电泳,得出表达差异变化的蛋白质表达谱,后使用ImageQuant软件对Typhoon扫描生成的文件进行优化,Decyder6.5进行数据分析两组之间比较用T检验,六组间比较用one-way ANOVA,得出差异有统计学意义的蛋白质点,进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析,后进行SwissProt及NCBInr搜库检索,鉴定出有表达意义的蛋白质点。[结果]2-DIGE后对原始数据用one-way统计分析比较6组间差异可得到P<0.0001的差异蛋白质点105个,并对六组间比较得出变化趋势图。对实验组与对照组做T-test得出表达升高及下调的量。对这些蛋白质点行MALDI-TOF/MALDI-TOF/TOF质谱分析,SwissProt数据库检索鉴定出蛋白质41种。根据功能,这些蛋白质可分为：(1)基本代谢相关的酶类：Succinyl-CoA:3-ketoacid-coenzyme A transferase 1, mitochondrial; Fruc-tose-bisphosp hate aldolase A;(3,5)-△(2,4)-二烯酰-辅酶A异构酶；甘油醛-3磷酸脱氢酶,丙酮酸激酶同工酶,磷酸甘油酸激酶1 (PGK1),26S proteasome non-ATPase regula-tory subunit 14, ATP合成酶,吡哆醇5’-磷酸氧化酶,异种核糖核蛋白H,半乳糖激酶,精氨酸琥珀酸合成酶；(2)细胞骨架类：波形蛋白,p链微管蛋白,细胞角蛋白CK8、CK7和CK10,肌动蛋白,F-肌动蛋白β；(3)应激相关蛋白：蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3);谷胱甘-S-转移酶(GST),a-烯醇酶；(4)信号转导分子：丝切蛋白；(5)分子伴侣：热休克蛋白60(HSP60),热休克蛋白β1,热休克蛋白70,HSP71,抑制素(PHB),T-结合蛋白1；(6)转录及翻译相关蛋白：远端上游元件结合蛋白,真核翻译起始因子5A-1,剪接因子U2AF 65；(7)磷酸化相关蛋白：波形蛋白,丝切蛋白,Lamin-A/C,血清白蛋白,增殖相关蛋白2G4,有丝分裂检查点蛋白BUB3；(8)细胞凋亡相关蛋白：丝切蛋白,丙酮酸激酶同工酶,真核翻译起始因子5A-1,HSP60,热休克蛋白70；(9)杂类：网格蛋白轻链A-△, (3,5)-△(2,4)-二烯酰-辅酶A异构酶,无机焦磷酸酶,D-3磷酸甘油酸,Scavenger mRNA-decapping enzyme Dcp。NCBInr数据库检索鉴定出蛋白质14种。其中细胞角蛋白CK8及果糖二磷酸醛缩酶A为与SwissProt查库结果重复。根据功能,这些蛋白质可分为：(1)基本代谢相关的酶类：过氧化还原酶-4,磷酸甘油酸盐变位酶1,3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase type-2 isoforml,黄素还原酶,过氧化还原酶-6,果糖二磷酸醛缩酶A；(2)细胞骨架类：细胞角蛋白CK8；(3)应激相关蛋白：微管去稳蛋白,BolA-like protein 2;(4)转录及翻译相关蛋白：Chain A, Crystal Structure Of The Ufcl, Ufm1 Conjugating Enzyme 1, Chain A, Human Translation Initiation Factor Eifla, Chain A, Crystal Structure Of Human Eukaryotic translation Initiation Factor Eif5a;(5)杂类：protein 4.1 isoform 3, hCG 15917, isoform CRA b。【结论】应用2-DIGE和MALDI-TOF-MS方法获得了较为理想的人舌癌Tca8113细胞2-DIGE差异蛋白质表达谱,初步鉴定了53种蛋白质。热诱导Tca8113细胞凋亡过程是一个多因素调控事件,且在凋亡的不同时段,调控因子有所不同。