淞江鲈(Trachidermus fasciatus Heckel),英文名：Roughskin sculpin,隶属于触形目(Scorpaeniformes),杜父鱼科(Cottidae),淞江鲈属(Trachidermus)。历史上淞江鲈分布区较广,现在由于环境污染和人为捕捞等因素,淞江鲈赖以生存和繁衍的生态环境遭到严重的破坏,淞江鲈在我国许多水域大量减少已至绝迹。在这种情况下,我国首家淞江鲈自然保护区己在山东省文登市埠口设立。此外,对淞江鲈进行人工驯养与繁殖也已成功,并进入规模化养殖阶段。当今,为保证动物可以在没有痛苦的状态下生活,福利养殖已经成为一个热点话题。机体对外界或内部各种刺激所产生的非特异性应答反应的总和称之为应激,过强或过长的应激反应会对养殖对象产生不利的影响。为了实现福利养殖和提高养殖效率,应避免因不适的外界条件而引起应激反应。热应激蛋白(HSPs)是一类存在于所有生物体包括鱼类细胞内比较保守的蛋白,在遇到外界刺激时,能诱导或增强其表达,以保护细胞免受损害。目前根据分子量大小可以把HSPs分为：HSP90、HSP70和小分子量HSPs。HSP70作为分子伴侣在协助新生多肽链折叠,蛋白质复合体的装配,以及调节、修护和降解变性的蛋白质方面起着重要作用。研究证明一些热应激蛋白可以作为指标测定鱼类的应激状态。鱼体在受到外界环境因子胁迫时,会生成大量的热应激蛋白,这些因素包括工业处理水、重金属离子、亚砷酸盐及寄生虫等环境因子。作为一类存在于包括鱼类在内的所有生物体细胞的蛋白,热应激蛋白在免疫学方面的应用价值也正日益受到人们的关注。研究表明,人类的许多疾病与人体内热应激蛋白的表达水平有关。由于热应激蛋白参与了生物的多种免疫应答过程,因此,外界刺激诱导生物机体产生的热应激蛋白能够增强生物对某些破坏性因子的抗性。一些热应激蛋白尤其是HSP70家族成员具有高度保守的序列以及在受到环境胁迫后能够大量表达,因此,HSP70作为指标来测定鱼类的应激状态。鉴于热应激蛋白在生物体免疫、抗病、环境适应等方面的重要性,本文根据鲤鱼热应激蛋白70(Heat shock protein,HSP70)基因序列(AY120894)设计并合成引物,以淞江鲈肝脏组织总RNA为模板,获得淞江鲈HSP70基因cDNA部分序列,长度为480bp,GeneBank登陆号为KC342053。根据已知序列,采用RACE技术克隆得到了热应激蛋白的cDNA全长,并进行了序列分析。序列分析结果显示此序列与红笛鲷(Lutjanus sanguineus)等有较高的同源性。获得淞江鲈cDNA全长2138bp,开放阅读框1947bp,编码了649个氨基酸。氨基酸同源比对表明,淞江鲈与其他已知鱼类部分序列的同源性为82%-99%,与两栖类、鸟类以及哺乳类的同源性为75%-86%。为了研究HSP70是否可作为养殖中的应激监测分子指标,应用所获淞江鲈HSP70基因部分序列,以淞江鲈β-actin基因的序列(HM449124)为内参,利用荧光定量PCR技术,检测25℃热应激状态下HSP70在淞江鲈肌肉、肠、脑、皮肤、性腺、肝脏、心脏、鳃、鳍9个组织的表达差异。结果表明,HSP70在淞江鲈9个组织中普遍表达,其中在鳍中表达量最高,在性腺、鳃、脑、肌肉、肝脏、皮肤、肠中的表达量依次递减,在心脏中表达量最低。这可能跟淞江鲈物种特异性有关,也可能是由于25℃还没有引起淞江鲈的强烈的应激反应。但鳍中HSP70的表达量可能成为衡量淞江鲈应激程度的指标。此外,还通过荧光定量PCR平台测得了8个器官或组织HSP70随季节的变化,HSP70在5个器官中夏天的表达最高,在3个器官中春天的表达最高,除了春天鳍表达量最低外,均是秋天表达量最低。对HSP70在鳍中的表达进行分析,发现夏天最高,其次是春天,这印证了HSP70淞江鲈对冷水的适应。HSP70今后无论是在理论方面还是在实际养殖方面,都有重要的指导意义。