氯嘧磺隆高效降解菌2N3生物特性及固化研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zeng007008
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氯嘧磺隆以超高效、广谱、低毒等优点而被广泛应用与农业生产生活中,但其长残效给人类生存环境及食品安全带来困扰,本文旨在通过微生物降解途径解决其残留,物理固化手段加速降解菌对氯嘧磺隆降解速度,使降解更高效安全,从而更快的减轻其带来的潜在危害。通过对氯嘧磺隆高效降解菌2N3进行生物特性及固化实验,结果表明:供试碳源中,葡萄糖参与共代谢是促进氯嘧磺隆降解的最优碳源,接菌至葡萄糖所在的培养基96h时可将5ppm氯嘧磺隆完全降解(降解率100%);蔗糖、麦芽糖虽也能被利用,维持2N3基本生长,但氯嘧磺隆降解速率仅为对照的45%-50%;供试氮源中,蛋白胨有利于2N3适应氯嘧磺隆存在的不良环境,促使2N3迅速生长但阻碍2N3对氯嘧磺隆的降解,其它供试氮源对氯嘧磺隆的降解无促进作用。2N3耐受力实验结果表明:一定范围内(5ppm-300ppm),随无机盐液体培养基中氯嘧磺隆浓度的增大,2N3OD600依次递减,即氯嘧磺隆浓度增大,对2N3生长繁殖影响越大。2N3最优生长环境正交实验表明:在如下实验条件:葡萄糖添加浓度5%,接菌量1%,氯化钠0.2%,通气量(三角烧瓶中培养液体积)100ml条件下2N3生长最优,18h OD600可达0.8。单因素固化实验表明:在海藻酸钠溶液浓度2.5%、氯化钙溶液界于1%-4%条件下,随氯化钙浓度增大,小球固化程度增大,性能较优良;在氯化钙浓度为4%,海藻酸钠溶液界于1.5%-3.5%之间,固化小球从外形以及硬度方面均较理想在单因素固化基础上,展开2N3最优固化降解条件筛选实验(五因素四水平),结果得出:在如下百分比浓度:氯化钙2%,海藻酸钠1.5%,2N3接菌量12%,无机盐液体培养基中氯嘧磺隆添加浓度5ppm,海藻酸钠菌悬液与氯化钙溶液投加比例5:1条件下,接菌24h,氯嘧磺隆理论降解效果最优。最优固化条件下的2N3固化菌稳定性试验表明:2N3固化菌体在室温(15℃±2℃)、无菌、无蒸发环境下保存76h,对氯嘧磺隆的降解与对照能力相等:者在氯嘧磺隆添加浓度5ppm的无机盐液体培养基中24h时可将其完全降解(降解率100%);2N3固化菌在(0℃±2℃)无菌、无蒸发环境下保存168h,对氯嘧磺隆的降解速度同对照对比得出仅为对照的80%。游离菌与固化菌在最适PH(6.5-7.5)降解氯嘧磺隆的能力为固化菌降解氯嘧磺隆速率为游离菌的2.7倍;酸性环境(PH=4)无机盐环境下,二者降解氯嘧磺隆速率均增大,但固化菌降解氯嘧磺隆速率仍为游离菌的2.7倍。排除酸性环境对固化小球的影响,参考氯嘧磺隆在酸性条件下极易水解特性,可解释该现象;碱性环境下,游离菌与固化菌在降解速率上与对照持平;但是外观观察发现:固化菌体破损率较中性环境有所上升。正交设计筛选的最优条件下形成的固化菌与游离菌在降解氯嘧磺隆上的性能比对试验表明:固化菌相对游离菌体显示出强大的降解能力,相同条件下,固化菌体28h内可将以葡萄糖为碳源的无机盐液体培养基中5ppm氯嘧磺隆降解完全,同期游离菌体则需要96h,显示出固化菌的高效降解性、安全性。
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