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目的:糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)是糖尿病(Diabetes Mell- itus,DM)最常见而严重的并发症,其发生率呈逐年上升的趋势,经统计,由DN而引起的终末期肾病(end stage renal disease,ESRD)在发达国家已占40%～50%。据了解,在糖尿病肾病的肾组织中有细胞凋亡的存在,近年来,国内外细胞凋亡的研究越来越深入,JNK通路引起细胞凋亡途径是近年才发现的一种凋亡途径。bcl-2是bcl-2家族中最有代表性的抑制细胞凋亡的因子之一。糖尿病肾病时肾脏细胞凋亡是否与JNK通路有关,JNK通路与bcl-2的表达是否有一定的相关性,缬沙坦减少尿蛋白,保护肾脏功能的作用是否与抑制细胞凋亡有一定关系,关于这些问题的研究报道不多,本研究应用1型糖尿病大鼠模型,检测了肾脏JNK、p-jnk、c-Jun和bcl-2的表达和细胞凋亡程度,同时了解缬沙坦是否对JNK通路和bcl-2表达有影响。方法:将清洁级Wistar大鼠随机分为正常对照(N组)和实验组。实验组腹腔注射链脲佐菌素,N组只注射等体积的枸橼酸盐缓冲液,将造模成功的大鼠随机分为糖尿病组(DM组)和药物干预组(T组),T组于造模成功后第一天给予缬沙坦灌胃,其余两组给予等量安慰剂。于注射STZ后2、4、8周留取三组大鼠的24小时尿液测尿蛋白定量,于4周和8周分两次处理大鼠,检测定血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血浆白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)和尿酸(UA),用免疫组化和Western blotting检测肾组织中JNK、p-jnk、c-Jun和bcl-2蛋白表达,流式细胞学检测肾脏细胞凋亡。采用SPSS13.0统计软件进行统计,数据用均数±标准差(x|ˉ±S)表示,组间比较方差齐采用方差分析,方差不齐采用非参数检验,应用pearson方法进行相关性分析,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:1.肾重指数(KW/BW):4周时DM组KW/BW与N组KW/BW比较明显增加(P<0.01);T组与DM组比较差异无统计学意义(P>0.05),但T组高于N组(P<0.01);8周时DM组与N组比较明显增加(P<0.01);T组与DM组比较差异无统计学意义(P>0.05),但T组仍有高于N组(P<0.01)。2.尿蛋白定量:2周和4周时DM组和T组尿蛋白定量与N组比较,差异无统计学意义(P>0.05);8周时DM组与N组比较,排出明显增加(P<0.05);T组较DM组减少(P<0.05),但T组始终高于N组(P<0.05)。3.血糖水平:4周DM组和T组血糖值与N组血糖值比较水平明显升高(P<0.01);8周时DM组和T组血糖值与N组血糖值比较血糖水平明显升高(P<0.01)提示造模成功,并很好维持;T组与DM组之间比较血糖水平有一定程度降低但无统计学差异(P>0.05)。说明本研究中所述指标变化与血糖水平无关。4.血脂、肾功能和血浆白蛋白水平:TG、TC、LDL-C、HDL-C、BUN、Scr、UA和ALB在三组间均无统计学差异。5.免疫组化:JNK、p-jnk和c-Jun表达结果:4周N组大鼠肾小球、近端及远端肾小管均有微量JNK、c-Jun和p-jnk表达; DM组和T组大鼠肾小球,肾小管及肾间质中阳性细胞数目增加,DM组较N组明显升高(P< 0.05),T组较DM组降低但差异无统计学意义(P>0.05);8周DM组大鼠肾组织中JNK、c-Jun和p-jnk在肾小球,肾小管及肾间质中表达均较4周时增加,以肾小管的表达增加更加明显,DM组较N组明显升高(P<0.05);T组较DM组降低(P<0.05),T组较N组表达也有增高(P<0.05)。bcl-2在三组大鼠肾脏中均有表达,4周时N组bcl-2主要表达于肾小管,DM组和T组bcl-2表达在近曲小管明显减少,T组较DM组bcl-2表达在近曲小管略有增加,在远端小管增加较明显;DM组较N组明显降低(P<0.05),T组较DM组升高但差异无统计学意义(P>0.05);8周时T组、DM组和N组中bcl-2的表达依次减少, DM组较N组明显降低(P<0.05),T组较DM组升高(P<0.05),8周时T组较N组表达也有降低(P<0.05)。6. Western blotting:4周时,DM组、T组和N组三组间JNK、c-Jun、p-jnk以及bcl-2表达差异均无统计学意义(P>0.05);8周时DM组JNK、c-Jun和p-jnk表达较N组增加(P<0.05),bcl-2表达降低(P<0.05),T组JNK和c-Jun表达比DM组降低(P<0.05),与N组比较差异无统计学意义(P>0.05);T组p-jnk比DM组降低(P<0.05),比N组升高(P<0.05);T组bcl-2较DM组升高(P<0.05),较N组降低(P<0.05)。7.流式细胞学: 4周时DM组大鼠肾组织细胞凋亡率较N组增加(P< 0.05),与T组相比差异无统计学意义(P>0.05),T组与N组比较无差别;8周时DM组大鼠肾组织细胞凋亡率较N组增加更明显(P<0.05),T组与DM组相比较凋亡率降低(P<0.05),T组较N组凋亡率升高(P<0.05)。8.相关性分析:JNK,p-jnk,c-Jun与细胞凋亡程度呈正相关(P<0.01); bcl-2与细胞凋亡程度及JNK,p-jnk,c-Jun均呈负相关(P<0.01)。结论:1. 1型糖尿病大鼠肾脏损伤早期就已经出现JNK通路激活增加和bcl-2的表达减少。2. JNK,p-jnk和c-Jun在1型糖尿病大鼠肾脏组织中的表达程度与肾脏细胞的凋亡水平呈正相关, bcl-2的表达与细胞凋亡呈负相关。3.缬沙坦可以减少尿蛋白排泄,该作用可能与抑制JNK通路活化或保护bcl-2因子表达有关。