【摘 要】
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产气荚膜梭菌在自然界是无处不在的,是多种健康动物肠道的常在菌,能造成人及多种动物发病,且有发病急、病程短、死亡快的特点,每年大量动物因感染产气荚膜梭菌而死亡,给养殖
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产气荚膜梭菌在自然界是无处不在的,是多种健康动物肠道的常在菌,能造成人及多种动物发病,且有发病急、病程短、死亡快的特点,每年大量动物因感染产气荚膜梭菌而死亡,给养殖业造成巨大损失。C、D型产气荚膜梭菌能单独或混合感染牛羊等多种动物,引起动物坏死性肠炎及肠毒血症,且两型感染短时间内难以区分。为了控制产气荚膜梭菌引起的多种疾病,本试验研制了C、D型产气荚膜梭菌类毒素二价苗及抗毒素血清,有效预防并治疗C、D型产气荚膜梭菌病。随着抗生素的广泛应用,细菌耐药性逐渐增强,特别是产气荚膜梭菌病一旦发生,抗生素难以治疗,用产气荚膜梭菌疫苗预防是最佳选择。根据产气荚膜梭菌致病是由其所产生外毒素引起的致病机理,本试验研制了安全、高效的类毒素疫苗。疫苗效力往往与抗原浓度成正比,为了提高抗原浓度,本试验选取实验室最佳菌株,将C型菌与D型菌以4:3比例接种于同一培养基,高效产毒,测得毒素对小鼠的半数致死量2-5.8/mL,并用该毒素制备了产气荚膜梭菌铝胶苗和白油苗。我国现有产气荚膜梭菌商品苗均为灭活铝胶联苗,免疫后发病时有发生,因此本试验研制了产气荚膜梭菌二价苗。为了证明疫苗的安全性和有效性,将两种疫苗做安全性检验,测定外毒素对家兔的最小致死量,并使用不同剂量疫苗免疫家兔,21d后做攻毒保护试验。结果表明:两种疫苗免疫家兔,免疫部位均无溃疡及肉芽肿,28d后剖检免疫部位无残留疫苗存在,两种疫苗均安全性良好;C型毒素对家兔的最小致死量为0.04m L,D型毒素对家兔的最小致死量为0.4m L;两种疫苗不同剂量免疫家兔,通过攻毒保护试验,测得铝胶苗对家兔的最小免疫剂量为2mL,白油类毒素苗对家兔的最小免疫剂量为1mL。产气荚膜梭菌发病后用抗生素难以治疗。抗血清作为一种快速的特异性治疗制剂,能快速中和毒素,治疗由C、D型产气荚膜梭菌引起的中毒性疾病。本试验使用高浓度毒素制备的油苗作为第一免疫原,除菌外毒素作为第二免疫原,制备高效价抗毒素血清,用间接ELISA法监测抗体水平变化,并使用小鼠中和试验检验抗血清的抗体水平。结果表明:本试验制备的高效价C、D型产气荚膜梭菌抗毒素血清,每0.1mL血清能中和400个C型毒素对小鼠的MLD和600个D型毒素MLD,有良好的应用前景。
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