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目的:观察益气活血通络方对糖尿病周围神经病变大鼠炎性细胞因子、神经生长因子及其受体表达的影响,探讨益气活血通络方治疗糖尿病周围神经病变的分子机制。方法:1.选择SPF级的雄性SD大鼠120只,在其中随机抓取15只大鼠作为正常组,其余大鼠采用小剂量链脲佐菌素(35mg/kg)诱导联合高脂高糖喂饲建立糖尿病大鼠模型。2.将造模成功的大鼠随机分为模型组、益气活血通络方高剂量组、益气活血通络方中剂量组、益气活血通络方低剂量组和阳性对照组。益气活血通络方高、中、低剂量组大鼠分别按每日9.0、4.5、2.25g/kg的剂量灌胃给药,阳性对照组以甲钴铵0.225 mg/kg的剂量灌胃,同时正常组和模型组的SD大鼠给予等量的蒸馏水灌胃,连续给药8周。3.在大鼠灌胃给药的期间,密切观察大鼠的一般状态,定期检测大鼠的血糖及体重变化情况,做好记录。给药8周后,在体检测大鼠摆尾温度阈值及坐骨神经传导速度。取材后,采用HE染色法、透射电镜的方法观察模型大鼠坐骨神经组织形态和超微结构的变化。用ELISA法检测大鼠血清TNF-a、IL-1、MMP-1、MCP-1及NGF的含量,RT-PCR检测坐骨神经NGF m RNA的表达,Western blotting测定大鼠背根神经节中p75NTR和Trk A蛋白表达。结果:1.与正常组进行比较,各造模组大鼠的血糖明显升高,差异有统计学意义(p<0.01),药物干预后各组大鼠血糖较模型组有所下降(p<0.05,p<0.01)。造模后,药物干预前,各组大鼠体重均有轻度增加,各组间无统计学差异(p>0.05)。药物干预8周,模型组大鼠体重下降,与正常组比较有显著性差异(p<0.01);益气活血通络方高剂量组和甲钴胺组大鼠体重较模型组显著增加(p<0.05)。2.与正常组比较,各造模组大鼠坐骨神经组织形态和超微结构发生改变,摆尾温度阈值显著升高(p<0.01),坐骨神经传导速度明显降低(p<0.01)。与模型组比较,益气活血通络方各治疗组和甲钴胺组的摆尾温度阈值显著降低、坐骨神经传导速度显著增加,差异有统计学意义(p<0.05,p<0.01)。3.与正常组比较,模型组大鼠血清中TNF-a、IL-1、MMP-1、MCP-1均显著升高(p<0.05,p<0.01),与模型组比较,各治疗组可抑制细胞因子的表达,差异有统计学意义(p<0.05,p<0.01)。4.模型组大鼠血清NGF表达明显降低,与正常组比较差异有统计学意义(p<0.01)。益气活血通络方与甲钴胺可使大鼠血清NGF表达显著升高,与模型组比较,差异有统计学意义(p<0.05,p<0.01)。模型组大鼠坐骨神经NGFm RNA的相对表达量显著降低,与正常组相比,差异有统计学意义(p<0.05)。与模型组比较,益气活血通络方各剂量组及甲钴胺组NGFm RNA的相对表达水平明显升高,差异有统计学意义(p<0.05,p<0.01)。5.模型组大鼠背根神经节中p75NTR表达水平明显升高,而Trk A的表达水平显著降低,差异均具有统计学意义(p<0.01)。与模型组比较,益气活血通络方高、中、低剂量组及甲钴胺组大鼠背根神经节中p75NTR的表达均有所降低,差异有统计学意义(p<0.05);而各治疗组大鼠背根神经节中Trk A的表达均有所升高,差异均具有统计学意义(p<0.01)。结论:1.高脂高糖饲养联合小剂量STZ诱导的方法建立糖尿病大鼠模型,坐骨神经组织形态和超微结构发生改变,摆尾温度阈值显著升高,而坐骨神经传导速度明显降低,DPN大鼠模型建立成功。2.模型大鼠血清中炎性因子TNF-a、IL-1、MMP-1及MCP-1蛋白表达明显升高,NGF的蛋白表达与坐骨神经NGF m RNA的相对表达量均有所下降,背根神经节中p75NTR表达水平明显升高,而Trk A的表达水平显著降低,表明炎性细胞因子与神经生长因子参与了DPN的发生发展。3.益气活血通络方能够显著降低大鼠血清中TNF-a、IL-1、MMP-1及MCP-1蛋白的表达,同时能明显增加NGF及Trk A的表达,降低p75NTR的表达。4.益气活血通络方具有改善DPN大鼠周围神经组织损伤的作用,降低炎性因子的表达及促进神经生长因子的分泌可能在其中发挥了重要的作用。