结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一，对人民的身体健康带来很大危害。近年来其发病率在持续上升。由于治疗模式的改变及科学技术的发展，使结直肠癌疗效有了一定的提高，但总体提高不显著，结肠癌和直肠癌的5年生存率仍在70﹪和50﹪左右徘徊。研究表明要提高结直肠癌患者的疗效要靠实行“三早”及个体化综合治疗。目前实现个体化治疗的主要依据是临床病理分期，常用的临床病理分期是Dukes及TNM分期，这两种分期系统为预测结直肠癌患者的预后及指导治疗提供了良好的依据，但它们都是以肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移为基础的，并没有考虑患者的异质性，临床发现同一分期的患者实行同一方案治疗效果不同，预后不同。于是学者们一直在研究能单独或结合临床病理分期更准确地判断患者预后及指导治疗的指标。有学者提出肿瘤分子病理分期的概念，将使肿瘤的治疗更贴近肿瘤的生物学发展原理，大大改变肿瘤以往的治疗策略，提高患者的生存率及预后。结直肠癌最佳的综合治疗是以手术为主联合化疗、放疗的治疗模式，手术及放疗同属局部治疗，而对晚期有转移的患者以化疗为主，但化疗的有效率低及毒性限制了使用。最近肿瘤的靶向治疗正在兴起，以其高选择性、低毒性的优势，正成为肿瘤治疗研究的热点。 要实现结直肠癌的“三早”、准确的分子病理分期及靶向治疗，都离不开分子生物学的发展，离不开对结直肠癌发生发展机制的研究。随着分子生物学技术的发展，越来越多的研究表明，Wnt/β-catenin信号通路的激活与结直肠癌的发生、发展起重要作用。但其中很多机制尚未完全清楚，通路中相关因子与结肠癌中的作用尚未完全明了，与结肠癌患者的预后关系有争论，需要深入研究，为肿瘤诊断及治疗提供新的思路及希望。本研究选取1995年1月～2003年5月在中山大学肿瘤防治中心住院手术的620例结肠癌患者临床资料及病理蜡块，挑选Wnt/β-catenin信号通路中有争论的相关因子Wnt1、β-catenin、Tcf4、Pin1及增殖、转移相关靶基因MMP7、CD44V7、Survivin、c-Myc、Cyclin D1、PPARγ，应用组织芯片及免疫组化技术着重从Wnt/β-catenin信号通路相关因子的相互关系及与结肠癌患者的预后方面，研究这一通路在结肠癌发生发展及转移方面中的作用；并通过抑制这一通路研究其对结肠癌的增殖及侵袭的影响，为结肠癌早期诊断、预后判断提供依据，为结肠癌的分子病理分期和靶向治疗提供理论基础。 第1章 Ⅱa(T3NOM0)期结肠癌根治术后预后多因素分析。 目的：研究影响Ⅱa(T3NOM0)期结肠癌患者预后因素，为评估Ⅱa期结肠癌患者的预后及指导治疗提供更好的依据。 方法：收集1990年1月～2003年5月243例根治性切除的Ⅱa期结肠癌患者临床资料，选择性别、年龄、血型、围手术期输血量、家族肿瘤史、病程、伴发病、术中化疗、术后化疗、肿瘤部位、肿瘤最大径，肿瘤大体类型、肿瘤分化程度、组织学类型、送检淋巴结数目共15项临床病理参数，采用Cox单因素和多因素分析的方法，研究影响Ⅱa期结肠癌患者预后因素。 结果：Cox单因素分析及多因素分析均显示围手术期输血、病理分级、送检淋巴结数目是影响Ⅱa期结肠癌患者肿瘤死亡的危险因素。 结论：围手术期输血、病理分级、送检淋巴结数目是影响Ⅱa期结肠癌患者肿瘤死亡的危险因素。 第2章 wnt/β-catenin信号通路相关因子与结肠癌患者预后关系的研究。 目的：研究wm/β-catenin信号通路相关因子与结肠癌患者预后的关系。 方法：选取1995年1月～2003年5月在中山大学肿瘤防治中心住院手术的620例结肠癌患者临床资料及病理蜡块，挑选Wnt/β-catenin信号通路中有争论的相关因子Wnt1、β-catenin、Tcf4、Pin1及增殖、转移相关靶基因MMP7、CD44v7、Survivin、c-Myc、Cyclin D1、PPARγ，应用组织芯片及免疫组化技术研究win/β-catenin信号通路相关因子的相互关系及与结肠癌患者的预后的关系。 结果：各因子在结肠癌组织均有表达，阳性率比正常组织高，P<0.05。Cox单因素及多因素分析结果示MMP7、Survivin是影响结肠癌患者肿瘤死亡的危险因素，阳性患者生存时间短，P<0.05；而CD44v7是影响结肠癌术后复发转移的危险因素，阳性患者术后越早复发转移，P<0.05。Spearman分析Pin1与β-catenin与其它因子呈正相关，P<0.05。 结论：各因子均与结肠癌的发生相关，MMP7、Survivin是影响结肠癌患者肿瘤死亡的危险因素，而CD44v7是影响结肠癌术后复发转移的危险因素。Pin1与β-catenin阳性可上调靶基因的表达。 第3章 Indomethacin体外对结肠癌细胞HCT116的影响及机制探讨。 目的：研究Indomethacin对结肠癌细胞株HCT116增殖及体外侵袭的影响并对其机制进行探讨。 方法：应用WST-8法测定Indomethacin 0、100、200、400、600、800μmol/L分别作用结肠癌细胞株HCT116细胞24h、48h、72h后HCT116细胞增殖能力；体外侵袭小室测定Indomethacin 0、100、200、400、600、800μmol/L作用HCT116细胞48h后HCT116细胞体外侵袭的能力。应用Westen-blotting方法检测应用Indomethacin 400μmol/L作用HCT116细胞24h、48h、72h后HCT116细胞β-catenin及其与增殖、转移相关靶基因Cyclin D1、MMP7蛋白的表达。 结果：Indomethacin能明显抑制结肠癌细胞株HCT116的增殖，呈时间—— Wnt/B-catenin信号通路对结肠癌生物学行为的影响剂量依赖性，24h、48h、72h IC50值分别为440.36μmol/L、323.9μmol/L，254.37μmol/L；并能明显抑制结肠癌细胞株HCT116的体外侵袭，呈剂量依赖性0、100、200、400、600、800μmol/L侵袭至膜下的细胞数分别为26.60±2.50、24.00±1.58、17.80±1.79、14.84±1.92、11.00±1.58、6.4±2.07个。Indomethacin作用24h、48h、72h后β-catenin、Cyclin D1、MMP7蛋白表达均有不同程度的下降。 结论：Indomethacin能抑制结肠癌细胞株HCT116增殖与转移，抑制β-catenin的表达而抑制Wnt/β-catenin信号通路，导致靶基因的下调是其机制之一。