牛初乳中抗高血压因子对大鼠心肌细胞钙内流的影响

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目的:本课题旨在研究牛初乳中抗高血压因子(AFBC)对氯化钾诱发的大鼠心肌细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)变化的影响,研究其心肌收缩抑制作用的可能机制。方法:以牛初乳为原料,利用超滤、离子交换层析、凝胶过滤层析技术对其中抗高血压成分的提取工艺进行了研究。通过多次重复凝胶过滤层析,降低终产物的含盐率,并应用原子吸收分光光度计对终产物Na含量进行分析。应用钙荧光指示剂Fura-2/AM负载培养的初生大鼠和急性分离的成年大鼠心肌细胞,用荧光分光光度计检测不同浓度AFBC对氯化钾诱发的心肌细胞钙内流的影响。结果:1.通过多次凝胶过滤层析,目的物的含盐率由54.15%降低到14.69%,可以满足细胞实验的要求。2.在对负载细胞以Hank’s液悬浮(细胞外钙浓度约为1.3mmol/L)时,50mmol/LKCl可显著升高大鼠心肌[Ca2+]i(与静息状态相比,P<0.01),而对负载细胞以无钙PBS以及D-Hank’s液悬浮,50mmol/LKCl对心肌[Ca2+]i无明显作用(与静息状态相比,P>0.05)。3.在0.5mg/mL浓度范围内,抗高血压因子对静息状态下心肌[Ca2+]i无显著性影响(与对照组相比,P>0.05)。4.抗高血压因子具有与维拉帕米相似的作用,在0.5mg/mL浓度范围内,能够呈浓度依赖的抑制高钾(50mmol/L)所致的[Ca2+]i升高。结论:本研究从细胞水平观察了不同浓度的AFBC对KCI诱导的心肌细胞内钙的影响。在排除神经、体液等因素干扰的前提下比较了AFBC和经典钙离子拮抗剂维拉帕米对心肌细胞的直接作用,提示AFBC与维拉帕米有相似的作用,其降血压机理是通过抑制心肌细胞外钙内流,从而抑制心肌收缩作用。但导致这种结果出现的具体细节,还有待进一步探讨。
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