目的：赤藓糖醇是一种新型的糖醇类甜味剂，具有低热量、高耐受、无毒副作用、吸湿性低等优点，近年来研究发现其还具有预防龋病的作用。牛奶含有丰富的营养成分，有“白色血液”之称，其中的钙、磷无机盐离子及酪蛋白等物质也具有防龋的效果。本研究试将赤藓糖醇与牛奶配伍，希望既发挥出赤藓糖醇蔗糖替代品的特点及牛奶营养丰富的优点，满足儿童对糖摄入量及生长发育的营养要求，又能够在一定程度上减少龋病的发生，探讨赤藓糖醇-牛奶混合液用于龋病预防的可行性及机理，为其安全广泛的使用提供实验依据。方法：1.构建体外人工龋模型采用细菌诱导法，选择变异链球菌（Streptococcus mutans，S.mutans）作为致龋菌种。在培养的第6h、12h、24h、36h、48h、60h和72h通过测定釉质块表面附着生物膜的光密度值来绘制生物膜生长曲线。测定釉质表面显微硬度值，至与建模前差异有统计学意义时停止实验，根据硬度值的改变判断是否形成早期的釉质龋坏。2.赤藓糖醇-牛奶混合液对变异链球菌生物膜影响的体外研究使用牛心脑浸液（Brain-heart infusion，BHI)、加氟牛奶溶液、牛奶、2%赤藓糖醇-牛奶混合液、4%赤藓糖醇-牛奶混合液、6%赤藓糖醇-牛奶混合液对实验一中建立的体外人工龋模型进行处理。建模120h后，剥离S.mutans生物膜，活菌计数法观察生物膜中活菌总量。激光共聚焦扫描显微镜（Confocal Laser ScanningMicroscopy，CLSM）观察细菌生物膜结构，以及计算生物膜不同部位的活菌百分比。3.赤藓糖醇-牛奶混合液对人工龋脱矿釉质影响的体外研究在建模第25d，测量釉质显微硬度值，与建模前比较差异有统计学意义，终止实验。去除表面生物膜后，测量釉质块显微硬度，提示矿物质丢失情况。环境扫描电镜（Environmental Scanning Electron Microscope，ESEM）观察釉质表面显微结构。结果：1.S.mutans生物膜表现出缓慢的非线性生长趋势，6~12h曲线直陡，12~48h变缓，48~72h曲线极为平缓。与实验前相比，人工龋组釉质块经处理后硬度值显著下降(P<0.05)，而对照组硬度值无明显变化(P>0.05)。2.BHI组活菌数显著高于其它组（P<0.05)；2%赤藓糖醇-牛奶组生物膜活菌数高于4%赤藓糖醇-牛奶组、6%赤藓糖醇-牛奶组的活菌数（P<0.05)；4%赤藓糖醇-牛奶组、6%赤藓糖醇-牛奶组、加氟牛奶组生物膜中活菌数差别不大，没有统计学意义（P>0.05)。CLSM观察发现加氟牛奶组、赤藓糖醇-牛奶组生物膜各层的活菌百分比高于BHI组及牛奶组，但生物膜结构松散，细菌疏松分布。3.各组釉质的硬度值均下降（P<0.05)；BHI组、牛奶组、2%赤藓糖醇-牛奶组显微硬度损失最多；4%赤藓糖醇-牛奶组、6%赤藓糖醇-牛奶组及加氟牛奶组显微硬度损失小。ESEM观察，BHI组釉质表面凸凹不平破坏最为严重；加氟牛奶组釉质表面平整，沉积了晶体颗粒；牛奶组釉质表面少量颗粒沉积；2%、4%、6%赤藓糖醇-牛奶组釉质表面均较平坦，矿物质颗粒似膜状覆盖，微孔减少；6%赤藓糖醇-牛奶组沉积物最饱满，微孔几乎消失。结论：1.应用该实验方法可以诱导建立出体外人工龋模型所需的S.mutans生物膜，建模终止时牙釉质具备牙釉质早期龋的基本表现，该模型可用于后续的实验研究。2.赤藓糖醇-牛奶混合液能够抑制S.mutans生物膜的生长及粘附，且4%与6%赤藓糖醇-牛奶混合液效果优于2%赤藓糖醇-牛奶混合液。3.各浓度的赤藓糖醇-牛奶混合液均能减轻表层釉质的脱矿程度，促进再矿化的发生，且6%赤藓糖醇-牛奶混合液再矿化作用最强。