搜寻合适的治疗靶点被认为是肿瘤免疫治疗开发的前提条件。研究表明,胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor,IGF1R)在肝癌(HCC)细胞中高表达,对促进HCC细胞生长、增殖起关键作用,是一种重要的肝癌标志物。因此,IGF1R成为肝癌治疗的研究热点,已有多个IGF1R单抗药物进入临床开发阶段。然而,单克隆抗体对肿瘤细胞的作用,主要机制是通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒性(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC),对肿瘤特别是实体瘤包括肝癌的作用十分有限。双特异抗体是近年来兴起的一种新型肿瘤免疫治疗技术,能桥接肿瘤细胞与T细胞,在肿瘤细胞和T细胞之间形成“免疫突触”,从而高效地介导T细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤。研究表明,双特异抗体介导的肿瘤特异杀伤效率比单抗强万倍以上。此外,双特异性抗体分子量小(仅为单抗1/3),易于渗入肿瘤组织,也有助于提高疗效。因而,双特异抗体具有巨大的应用前景。但双特异性抗体半衰期短,需连续给药,给治疗带来了诸多不便。我们计划用基因载体在长期稳定表达双特异抗体来克服这些问题,具体包括:1)构建基于微环DNA基因载体,表达双特异抗体Anti-IGF1R/CD3;2)开发新型有机-无机基因递送系统stPEI-CaP/MC.DNA。结果表明,stPEI-CaP/MC.DNA能高效转染HEK293t细胞,表达anti-IGF1R/CD3抗体,并且对细胞几乎没有毒性;Anti-IGF1R/CD3双特异抗体能具有介导T细胞靶向、高效清除肝癌细胞。本研究进一步证明,基于微环DNA载体表达双特异抗体的抗癌策略的可行性,并为肝癌的免疫治疗提供一种可供选持的基因药物。