植物雄性不育基因表达载体的构建及烟草的转化

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1.将A9启动子与核糖核酸酶Barnase基因和Nos终止子连接,构建了雄性不育基因,并将其插入到带有抗除草剂基因Bxn的植物表达载体中.2.构建了新的A6、A9、TA29花药绒毡层特异启动子,及其相应的A6、A9、TA29、Barnase不育基因,并与Bxn基因串连.3.分别用A6-Barnasea,A9-Barnase单价不育基因,TA29-Barnase、A9-Barnase双价不育基因,及A6-A9-TA29-Barnase三个启动子的不育基因转化烟草,所得转基因烟草经PCR检测后测定其抗溴苯氰抗性,抗性浓度达到10<-3>M.4.对不育基因烟草进行花期观察,雄性不育植株主要表现为(1)花粉量少或近乎没有花粉.(2)花粉形态畸形.(3)花粉不能萌发或萌发率底.其它方面的发育状况未见任何差异.5.构建了植物基因工程强启动子表达载体OCS3,OCS6,AC1和940,经农杆菌介导转化烟草,通过对转基因烟草GUS酶活的检测,获得了比35S启动子活性高13倍的强启动子AC1.
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