microRNA-149*对膀胱癌T24细胞体外增殖、凋亡及侵袭的影响

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目的:观察microRNA-149*(miR-149*)对人膀胱癌T24细胞体外增殖、凋亡、和侵袭的影响,探讨miR-149*对膀胱癌T24细胞发生发展的可能机制。方法:应用化学方法合成microRNA-149*mimics,瞬时转染T24细胞。实时定量RT-PCR,Western Blot实验分别从基因和蛋白方面验证转染后microRNA-149*在T24细胞中的表达上调。然后分别通过流式细胞计数、MTT、transwell实验、细胞粘附实验分别检测microRNA-149*对T24细胞的凋亡、增殖、侵袭能力及细胞粘附能力的影响。结果:1.化学合成microRNA-149*mimics,瞬时转染T24细胞,浓度在50nM时miRNA转染细胞率在90%。2.实时荧光定量PCR及Western blot实验,结果miR-149*的表达在转染miR-149*mimics后的T24细胞组中与阴性对照组及空白对照组相比明显增加,表明miR-149*在膀胱癌T24细胞中明显上调。3.流式细胞学检测,结果转染miR-149*mimics后的T24细胞其凋亡和坏死比例明显上升。4. MTT实验细胞计数后,结果表明转染miR-149*后的T24细胞生长速度减慢,细胞增殖受抑制。5. transwell实验穿过基质胶的细胞计数,结果表明转染miR-149*后的T24细胞体外侵袭能力减弱。6.细胞粘附实验结果所示,转染miR-149*后的T24细胞粘附性增强。结论:1.体外转染miR-149*后的T24细胞增殖受抑制、加快其凋亡、细胞粘附性增加,并且降低其侵袭能力。2.miR-149*差异表达可能参与了人膀胱移行细胞癌的发生与发展。
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