聚乳酸聚乙二醇嵌段共聚物复合材料及应用基础研究

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:flyindirty2008
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目的:评价 PLA-PEG的亲水性能、生物相容性以及体内降解率,比较PLA-PEG与PLGA的优缺点;通过PLA-PEG/rhBMP-2复合材料的制备、力学指标测定和下颌骨缺损修复实验,探讨PLA-PEG作为人工骨支架材料的可行性。材料和方法:1.亲水性研究将均质的PLA105000-PEG2000(4:1)和PLGA100000(4:1)做成膜,室温下测定其与水的接触角;PLA-PEG和PLGA加工成直径2mm,长7mm的圆柱状试件,在PBS缓冲液中浸泡一周后取出,蒸馏水漂洗后吸干试件表面的水分,然后在室温下自然干燥一周,通过干燥前后试件的重量差,得出两种材料的吸水率。2.生物相容性与降解率的研究将直径2mm,长7mm的圆柱状PLA-PEG和PLGA试件植入大鼠背部,分别于术后1w、3w、6w、12w处死,切取试件及其周围组织及大鼠的肝、肾组织。将试件取出,干燥,计算体内降解率;试件周围组织及肝、肾组织HE染色,行组织病理学观察。3.PLA-PEG/rhBMP-2多孔复合材料的制备及力学性能测定2g PLA-PEG溶于10ml二氧六环,加入制孔剂(蔗糖)10g,碳酸氢钠1g,充分混合均匀后注入预先做好的15mm×6mm×5mm的模具中;在其中16个模具中每个加入100μg的rhBMP-2冻干粉,混合均匀,-70℃下将材料冻干成大小为15mm×6mm×5mm的块状材料;剩余的糊状物注入长1.6cm,内径0.8cm的玻璃管中,与上述材料一起冻干,即成压缩模件。在温度20℃,湿度25%条件下测定其压缩强度和压缩模量。4. PLA-PEG/rhBMP-2多孔复合材料修复兔下颌骨缺损 <WP=43>以高速涡轮牙钻机在兔的下颌下缘做一15mm×6mm的全层缺损,实验组植入PLA-PEG/rhBMP-2多孔复合材料,对照组植入不含rhBMP-2的PLA-PEG多孔材料,于术后2w、4w、8w、16w处死实验动物,将下颌骨连同材料一并取出,拍摄X光片,脱钙,切取材料及其周围部分宿主骨组织HE染色,行组织病理学观察,通过密度分析软件对拍摄的X光片进行密度分析。结果1.亲水性研究PLA-PEG与水的接触角为66.33±2.60,吸水率为4.74±0.56%;PLGA的接触角为74.50±2.51,吸水率为3.23±0.75%。PLA-PEG的接触角略小于PLGA,吸水率略高于PLGA(P<0.001)。2.生物相容性与降解率的研究PLA-PEG组:1w时可见在材料周围有中等程度的淋巴细胞浸润,其下方可见成纤维细胞,有小血管增生、扩张;3w时成纤维细胞和小血管数量增多,淋巴细胞数量减少;6w时,纤维包膜变薄,纤维细胞数量增加,淋巴细胞数量明显减少,纤维囊内可见少量材料碎片;12w时,纤维包膜由6~7层成熟的纤维细胞构成,某些部位纤维包膜细胞层增厚,成锥状伸入囊内,包膜周围有散在的淋巴细胞。PLGA组:1w时可见材料周围有中等程度的淋巴细胞浸润,数量较PLA-PEG组略少,其下方可见成纤维细胞,有小血管增生、扩张;3w时成纤维细胞数量增多,有少量淋巴细胞浸润;6w和12w时,纤维包膜厚度变化不大,淋巴细胞数量明显减少,纤维囊内碎片数量较PLA-PEG组多。四组大鼠的肝肾组织均未见异常。PLA-PEG在1w、3w、6w、12w的降解率分别为3.15±0.58%、3.76±0.38%、5.24±2.16%、12.23±1.56%,PLGA分别为4.62±1.06%、11.95±1.50%、20.48±1.10%、47.89±2.46%。PLGA的降解率高于PLA-PEG<WP=44>(P<0.02,P<0.001)。3.PLA-PEG/rhBMP-2多孔复合材料的制备及力学性能测定 复合材料的大小为15mm×6mm×5mm,孔径300~500μm,孔隙率为78%,压缩强度为30.05±3.12Mpa,压缩模量为371.67±12.37Mpa。4. PLA-PEG/rhBMP-2多孔复合材料修复兔下颌骨缺损实验组:2w时植入区可见材料碎片周围有多核巨噬细胞包绕材料,材料周围有较多量的骨髓间充质干细胞,邻近骨组织内成骨活跃;4w时材料残余的体积明显变小,材料周围可见骨髓间充质干细胞,多核巨噬细胞少见,材料内有小的骨岛形成,邻近的骨组织伸出指状突起长入材料内部;8w时材料已大部降解,有大量骨髓间充质干细胞环绕在材料碎片周围,材料近骨侧已有大块的新生骨形成;16w时材料已基本完全降解,其周围可见骨髓间充质干细胞,材料内部可见新生骨形成。对照组:2w时可见材料碎片周围有多核巨噬细胞围绕,未见骨髓间充质干细胞,邻近骨组织内新生骨少见;4w时材料残余的体积明显变小,在植入区及邻近骨组织内均未见新生骨;8w时材料大部降解,残余碎片周围偶见有淋巴细胞;16w时材料已基本完全降解,未见淋巴细胞,纤维细胞明显增多,形成纤维性的支架。 X线表现: 2w时,对照组缺损区为均一的低密度透射影,实验组可见在低密度透射影上有颗粒状较高密度的阻射影;4w,对照组仍为低密度影,实验组在缺损区的低密度影上有片状的较高密度阻射影; 8w,对照组在低密度影上出现少量周界不清的云雾状阻射影实验组可见较高密度的阻射影像联结成片,布满整个缺损区域,;16w,对照组的材料大部分已被吸收,残余部分的密度增高,但明显低于周围骨的密度,实验组则呈高密度影,密度与周围骨密度相似。 实验组在2w、4w、8w、16w缺损区的密度分别为51.84±4.98,58.20±1.33,71.05±10.28,100.01±7.36,对照组分别为27.01±0.78,36.81±1.70,31.15±3.73,59.45±8.95。实验组随时间变化缺损区密度呈增高<WP=
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