玉米不同外植体愈伤组织诱导及分化的研究

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本实验以玉米杂交种先玉335的成熟胚、丛生芽及无菌苗为外植体,以两种基本培养基MS和N6为基本培养基,在培养中添加两种生长素2,4-D和NAA和细胞分裂素6-BA,并对成熟胚诱导出的愈伤组织进行了分化培养,又以B73、B105、B113、吉818和Mo17的成熟胚为外植体对这五个基因型进行了研究。结果表明:1.2,4-D的成熟胚愈伤组织诱导效果优于NAA;加了细胞分裂素6-BA的培养基诱导率虽然高,但褐化严重;基本培养基N6比MS对成熟胚愈伤组织的诱导率略高但差异不大;当生长素为2,4-D时诱导出的愈伤组织质量优于NAA,其中在2,4-D浓度为2.0mg/L的条件下愈伤组织质量最好。2.玉米种子经过48小时预处理是最有利于玉米成熟胚愈伤组织诱导的;在预处理无菌水中添加4.0mg/L的2,4-D有利于成熟胚愈伤组织诱导;硝酸银不利于成熟胚愈伤组织诱导,而脯氨酸和水解酪蛋白也会略降低成熟胚愈伤组织诱导率。3.当2,4-D和NAA浓度同为低浓度时对愈伤组织的诱导率基本上相同,而当生长素浓度提高的时候诱导率差异非常明显:2,4-D的诱导效果优于NAA的诱导效果,MS中2,4-D浓度3.0m/L的成熟胚丛生芽愈伤组织诱导率达到最高,N6中2,4-D在1.0mg/L达到最高;N6对成熟胚愈伤组织的诱导比MS要有利。4.2,4-D的叶片愈伤组织诱导效果优于NAA的;各个浓度2,4-D的叶片愈伤组织诱导率均差别不大且诱导率均不高;基本培养基MS对叶片愈伤组织的诱导率明显高于N6,说明MS基本培养基比较适合叶片愈伤组织的诱导。5.在N6+2,4-D(1.0mg/L-8.0mg/L)这个成熟胚愈伤组织诱导试验中,五种基因型的玉米都可以诱导出愈伤组织,从总体平均数看,B113的成熟胚愈伤组织诱导率最好,其次为B73和吉818,B105和Mo17的成熟胚愈伤组织诱导率为最低。6.6-BA的出绿点率和出芽率与KT的都相差不大,但KT的褐化率明显低于6-BA的:而在细胞分裂素均为6-BA但浓度不同以及相同浓度的生长素条件下,细胞分裂素浓度越低,越有利于提高玉米成熟胚愈伤组织的分化率;在生长素NAA为1.5mg/L与细胞分裂素为2.0mg/L的配比下,玉米成熟胚愈伤组织的分化率为最高。
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