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人参（Panax ginsengC.A.Meyer）系五加科（Araliaceae）多年生草本植物，含有皂苷、糖类、蛋白质、多肽氨基酸、维生素等多种活性物质。人参具有保湿润肤、抗氧化、抗紫外线对皮肤的损伤等美容功效，其提取物常作为重要成分添加在很多化妆品中。人成细胞纤维因子2(Fibroblast growth factor，FGF2)在人体内含量低，但FGF2是一种有活性多功能生长因子，它在促进组织生长发育、新血管形成、参与组织创伤修复过程等临床应用方面有着巨大的前景。本研究将FGF-2基因进行了克隆和纯化，利用PCR和双酶切方法构建植物表达载体；发根农杆菌A4介导将含有FGF-2基因的植物表达载体转入到人参细胞内，最终得到含有FGF2基因的转基因人参发根系；对转基因人参发根异源表达的FGF2蛋白进行鉴定和分析。为人参发根作为生物反应器生产药用蛋白的产业开发奠定了基础，同时也为FGF2基因大量生产提供了理论基础。本文的主要研究内容与结论如下：1.植物表达载体以及工程菌构建：以pET16+FGF2载体为模板，将FGF-2基因进行大量克隆和纯化，然后利用PCR和酶切连接技术构建了植物表达载体，将构建好的载体命名为pBI121-FGF2。通过冻融法将pBI121-FGF2植物表达载体转入到发根农杆菌A4菌株中，构建工程菌命名为：A4-pBI121-FGF2。2. A4-pBI121-FGF2对人参的遗传转化：利用制备好的工程菌A4-pBI121-FGF2和空pBI121质粒分别对三年生人参根片外植体进行侵染，诱导出人参发根；转基因组人参发根和空白对照组发根都表现出正常典型的发根形态，二者在形态变化上没有显著性差异；利用分子生物学的方法筛选含有FGF2外源基因的阳性克隆人参发根。3.异源表达FGF-2蛋白的转基因人参发根鉴定：以A4-pBI121-FGF2工程菌诱导转化得到的转基因人参发根系为材料，利用分子生物生物学的方法检测FGF2基因整合到人参发根基因组中；提取人参发根蛋白，利用SDS-PAGE和Western blot证明外源基因FGF-2在人参发根内已经得到表达。4.转基因人参发根总皂苷和部分单体皂苷的含量测定：测定结果表明，随着培养天数的增加，转基因发根中总皂苷含量与时间成正比例增长，在一个月后总皂苷的含量基本保持不变，30天时转基因人参发根总皂苷含量(22.51)高于空白对照人参发根总皂苷含量(20.47)；利用高效液相法测得转基因人参发根中三种单体皂苷含量高于对照发根的三种单体皂苷含量。5.转基因人参发根多糖含量检测：测定结果表明，培养30天时转基因人参发根粗多糖含量(11.5)高于空白对照人参发根粗多糖含量(9.5)，差异性显著（P﹤0.05）。