论文部分内容阅读
[目的]研究氟和亚硫酸钠单独及联合作用对小鼠睾丸组织中MAPK信号通路的影响,以探讨氟和亚硫酸钠对雄性生殖系统的毒性机制,为氟中毒防治以及亚硫酸钠对雄性生殖系统的损害提供动物实验依据。[方法]模拟环境污染,以健康的雄性昆明小鼠为实验动物,建立不同染毒时间(7周,14周)的小鼠实验模型,设1个对照组和3个实验组,整个试验期间对照组小鼠自由饮用去离子水；氟组饮用150mg/L氟化钠(NaF)去离子水;亚硫酸钠组饮用500mg/L亚硫酸钠(Na2SO3)去离子水；联合组饮用150mg/L NaF+500mg/L Na2SO3去离子水。实验结束时取小鼠的睾丸组织,应用Real-time PCR技术检测睾丸组织MAPK信号通路中ERK1/2/5、JNK1/2/3、p38及JNK途径下游转录因子C-Jun、JunD、Elk-1、ATF-2基因mRNA表达量的变化。[结果](1)Real-time PCR结果显示,染毒7周时,与对照组相比,各实验组ERK2基因mRNA的表达分别下降29.4%、52.9%、54.4%,其中亚硫酸钠组和联合组差异显著(P<0.05)。与对照组相比,氟组、亚硫酸钠组、联合组中JNK2基因mRNA的表达水平分别下降29.6%、59.3%、56.8%,其中亚硫酸钠组和联合组差异极显著(P<0.01)。而与对照组相比,氟组、亚硫酸钠组、联合组ERK1、JNK1、JNK3、ERK5基因mRNA的表达水平差异无统计学意义。(2)Real-time PCR结果显示,染毒14周时,与对照组相比,氟组、亚硫酸钠组、联合组JNK1基因1mRNA表达水平分别下降39.1%、61.8%、25.5%,其中亚硫酸钠组组差异显著(P<0.05)；与对照组相比,氟组和亚硫酸钠组和联合组JNK2基因mRNA表达水平分别下降48.9%、39.8%、37.5%,三个实验组差异均极显著(P<0.01),而与对照组相比,各实验组ERK1、ERK2、ERK5、JNK3和p38基因mRNA的表达差异无统计学意义。(3)Real-time PCR结果显示,染毒7周时,氟组、亚硫酸钠组、联合组C-Jun、JunD、 Elk-1、ATF-2基因mRNA表达水平与对照组相比均没有表现出显著的差异；染毒14周时,与对照组相比,氟组、亚硫酸钠组、联合组C-Jun基因nRNA表达水平分别升高44.7%、31.2%、30.7%,差异均显著(P<0.05)；JunD基因mRNA表达水平分别升高92.1%、36.6%、150.5%,其中氟组差异显著(P<0.05),联合组差异超显著(P<0.001)；氟组和联合组Elk-1基因mRNA表达水平分别升高53.5%、34.9%,差异均显著(P<0.05),亚硫酸钠则组下降8.1%；与对照组相比,ATF-2基因表达水平只有氟组与对照组相比差异显著(p<0.05),其余各组相比对照组均不显著。[结论]本研究采用荧光定量PCR技术分别对小鼠睾丸组织ERK1/2/5、JNK1/2/3、p38基因mRNA及JNK下游转录因子C-Jun、JunD、E1K-1和ATF-2mRNA基因表达变化进行研究,结果表明本实验模型中,氟和亚硫酸钠在JNK信号通路mRNA水平上对小鼠睾丸组织产生影响,并对小鼠睾丸JNK下游基因表达有影响,氟和亚硫酸钠对雄性生殖系统损伤时通过激活JNK通路并影响下游C-Jun、JunD和Elk-1转录因子的活性来调控的,并且二者联合中毒的过程中氟起主要作用,亚硫酸钠对雄性生殖系统的毒性不强或者与氟化钠有拮抗作用。