论文部分内容阅读
目的：
探讨补肾解毒散结方促进人骨肉瘤U-2 OS细胞凋亡的作用和探讨其诱导凋亡的作用机理,初步阐明补肾解毒散结方抗骨肉瘤的部分机制,为中药复方治疗骨肉瘤提供实验依据。
方法：
1.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测补肾解毒散结方对人骨肉瘤U-2 OS细胞的增殖抑制作用。
2.采用流式细胞法(FCM)检测补肾解毒散结方对人骨肉瘤U-2 OS细胞凋亡和细胞周期的影响。
3.采用实时荧光定量.聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测补。肾解毒散结方对人骨肉瘤u-2 OS细胞p53、bcl-2基因表达的影响。
4.用《中国医学百科全书·医学统计学》统计软件包(PEMS 3.1)统计软件进行统计学分析。各组数据指标用均数士标准差(-X±S)表示,方差齐性检验后,采用单因素多样本方差分析,均数间两两比较采用SNK-q检验(Student-Newman-Keuls法),检验标准以P<0.05为差异有显著性。
结果：
1.MTT结果显示补肾解毒散结方使人骨肉瘤U-2 OS细胞生长受到抑制,并且随着浓度及药物作用时间的增加,抑制率也逐渐增加,经统计学分析各组之间比较有差异(p<0.05),空白血清组与正常组之间没有差异。
2.流式细胞术结果显示5％、10％的中药血清可使细胞主要阻滞于G0-G1期,20％浓度中药血清能使细胞阻滞于G0-G1期和s期,从而减少进入G2-M期的细胞数,从而促进细胞凋亡。
3.Real-time PCR结果显示随着培养体系中药物血清浓度的增加,p53 mRNA表达呈上升趋势,而bcl-2 tuRNA表达呈下降趋势,各组之间均有统计学意义(p<0.05),空白血清组与正常组p53 mRNA和bcl-2 mRNA表达均没有差异(p>0.05)。
结论：
1.补肾解毒散结方对人骨肉瘤U-2 OS细胞的增殖有抑制作用,并与药物浓度和药物作用时间呈正相关。
2.补肾解毒散结方可诱导人骨肉瘤U-2 OS细胞凋亡、并阻滞细胞于G0-G1期。
3.补肾解毒散结方上调人骨肉瘤U-2 OS细胞p53 mRNA表达和下调bcl-2 mRNA表达可能是其抑制增殖和诱导凋亡的机制之一,其抗骨肉瘤作用可能与上调人骨肉瘤U-2OS细胞p53 mRNA表达和下调bcl-2 mRNA表达有关。