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长根菇(Oudemansiella raphanipes),商品名黑皮鸡枞,是近年来我国刚实现商品化栽培的一种珍稀食用菌,其口感细腻,并富含多种营养物质,具有增强人体免疫功能、降血压、抗菌等功效,因此备受消费者青睐,市场前景极其广阔。但是,目前国内外对长根菇营养生理方面缺乏系统研究,尤其有关栽培阶段碳氮营养方面及环腺苷酸(cAMP)调控子实体生长发育的研究少有报道,cAMP是一种重要的细胞信号传导的第二信使,其含量对食用菌子实体的形成有很大影响。因此,本论文以碳氮营养理论为出发点,筛选长根菇高效栽培配方,并研究cAMP对子实体生长发育的调控作用,为缩短栽培周期提供理论指导。
本研究通过对长根菇母种、原种及栽培阶段最适C/N、最佳碳、氮源及含量筛选,并从木质素、纤维素降解酶的角度揭示不同碳源利用规律,确定长根菇适宜母种、原种培养基及高效栽培配方;通过对长根菇不同生长发育阶段cAMP含量变化规律、原基分化前喷施外源cAMP抑制剂NaF及cAMP,探究cAMP对长根菇子实体生长发育过程的调控作用。
主要研究结果如下:
1.通过对长根菇母种培养基C/N初筛(设置C/N为10∶1-45∶1,梯度为5∶1)、复筛(设置C/N为26∶1-44∶1,梯度为3∶1)试验,通过观察菌丝生长情况及生物量,最终筛选出长根菇母种培养基最适C/N为32∶1;选用甘露醇、葡萄糖、果糖、纤维二糖、蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉共七种碳源物质和胰蛋白胨、蛋白胨、牛肉膏、酵母浸粉四种氮源物质,进行最佳碳、氮源筛选,筛选出最佳碳、氮源分别为蔗糖和酵母浸粉;以蔗糖为碳源设置含量为16g/L、18g/L、20g/L、22g/L、24g/L筛选出最佳蔗糖含量为20g/L,以酵母浸粉为氮源设置含量为2g/L、3g/L、4g/L、5g/L、6g/L筛选出最适酵母浸粉含量为3g/L。
2.原种培养基选用棉籽壳、玉米芯、木屑三种碳源主料,分别设置C/N为32∶1、35∶1、38∶1、41∶1、44∶1,通过比较菌丝生长速度、生长势等指标,筛选出木屑、棉籽壳为碳源主料的培养基最适C/N均为35∶1;以玉米芯为碳源主料的培养基最适C/N为38∶1-44∶1。在同-C源,不同C/N配方的CMC酶、HC酶、漆酶酶活性随菌丝的生长,其酶活性呈先上升后下降趋势,在菌丝长速在最快时期达到酶活最高,且在三种碳源主料配方呈现的规律一致。
3.栽培种主要碳源选用木屑、棉籽壳、玉米芯、(木屑+杏鲍菇菌糠),分别设置C/N为30∶1、35∶1、40∶1三个梯度。通过分析比较菌丝期生长情况、生育周期、子实体农艺性状、产量、营养品质等指标,筛选出最佳碳源主料为棉籽壳,最适C/N为35:1,即最佳栽培配方为棉籽壳72%,豆粕7%,麸皮20%,石灰1%,料水比为1∶1.4;生物学效率比对照提高了6.41%。
4.选取长根菇生长发育六个时期,即菌丝半袋期、菌丝满袋期、原基形成期、菇蕾形成期、了实体生长期、子实体采收期,采用LC-ESI-MS分析方法测定菌丝体中cAMP含节,研究发现原基形成期cAMP含量最高:在原基形成前喷施氟化钠和环腺苷酸,浓度分别为4mmol/L、6mmol/L、8mmol/L、10mmol/L,通过对生育周期、子实体农艺性状、产量、营养品质等指标进行比较分析,研究结果表明:喷施8mmol/L的cAMP可明显促进长根菇原基的分化,表现为原基数量显著增加,原基形成时间显著缩短,其生物学效率较对照增加了11.11%,说明适宜浓度的cAMP可明显促进长根菇原基的分化;喷施6mmol/LNaF的处理,头潮菇出菇时间延长了3d,而二潮菇产量显著增加,两潮菇产量较对照显著增加3.4%。
本研究通过对长根菇母种、原种及栽培阶段最适C/N、最佳碳、氮源及含量筛选,并从木质素、纤维素降解酶的角度揭示不同碳源利用规律,确定长根菇适宜母种、原种培养基及高效栽培配方;通过对长根菇不同生长发育阶段cAMP含量变化规律、原基分化前喷施外源cAMP抑制剂NaF及cAMP,探究cAMP对长根菇子实体生长发育过程的调控作用。
主要研究结果如下:
1.通过对长根菇母种培养基C/N初筛(设置C/N为10∶1-45∶1,梯度为5∶1)、复筛(设置C/N为26∶1-44∶1,梯度为3∶1)试验,通过观察菌丝生长情况及生物量,最终筛选出长根菇母种培养基最适C/N为32∶1;选用甘露醇、葡萄糖、果糖、纤维二糖、蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉共七种碳源物质和胰蛋白胨、蛋白胨、牛肉膏、酵母浸粉四种氮源物质,进行最佳碳、氮源筛选,筛选出最佳碳、氮源分别为蔗糖和酵母浸粉;以蔗糖为碳源设置含量为16g/L、18g/L、20g/L、22g/L、24g/L筛选出最佳蔗糖含量为20g/L,以酵母浸粉为氮源设置含量为2g/L、3g/L、4g/L、5g/L、6g/L筛选出最适酵母浸粉含量为3g/L。
2.原种培养基选用棉籽壳、玉米芯、木屑三种碳源主料,分别设置C/N为32∶1、35∶1、38∶1、41∶1、44∶1,通过比较菌丝生长速度、生长势等指标,筛选出木屑、棉籽壳为碳源主料的培养基最适C/N均为35∶1;以玉米芯为碳源主料的培养基最适C/N为38∶1-44∶1。在同-C源,不同C/N配方的CMC酶、HC酶、漆酶酶活性随菌丝的生长,其酶活性呈先上升后下降趋势,在菌丝长速在最快时期达到酶活最高,且在三种碳源主料配方呈现的规律一致。
3.栽培种主要碳源选用木屑、棉籽壳、玉米芯、(木屑+杏鲍菇菌糠),分别设置C/N为30∶1、35∶1、40∶1三个梯度。通过分析比较菌丝期生长情况、生育周期、子实体农艺性状、产量、营养品质等指标,筛选出最佳碳源主料为棉籽壳,最适C/N为35:1,即最佳栽培配方为棉籽壳72%,豆粕7%,麸皮20%,石灰1%,料水比为1∶1.4;生物学效率比对照提高了6.41%。
4.选取长根菇生长发育六个时期,即菌丝半袋期、菌丝满袋期、原基形成期、菇蕾形成期、了实体生长期、子实体采收期,采用LC-ESI-MS分析方法测定菌丝体中cAMP含节,研究发现原基形成期cAMP含量最高:在原基形成前喷施氟化钠和环腺苷酸,浓度分别为4mmol/L、6mmol/L、8mmol/L、10mmol/L,通过对生育周期、子实体农艺性状、产量、营养品质等指标进行比较分析,研究结果表明:喷施8mmol/L的cAMP可明显促进长根菇原基的分化,表现为原基数量显著增加,原基形成时间显著缩短,其生物学效率较对照增加了11.11%,说明适宜浓度的cAMP可明显促进长根菇原基的分化;喷施6mmol/LNaF的处理,头潮菇出菇时间延长了3d,而二潮菇产量显著增加,两潮菇产量较对照显著增加3.4%。