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本论文通过分子克隆技术手段，从株自筛选高产果糖基转移酶的米曲霉菌株中获得了果糖基转移酶基因片段，通过对基因序列的对比分析，发现其与数据库中米曲霉果糖基转移酶基因存在定差异性。将该酶基因进行分离纯化，并克隆到大肠杆菌原核表达系统和巴斯德毕赤酵母真核表达系统中，实现了果糖基转移酶蛋白在胞内或胞外的重组表达，为果糖基转移酶的大规模生产以及低聚果糖生产工艺的进步改善奠定理论基础。首先通过Trizol法实验室从自行保藏的米曲霉SBB201中提取总RNA，然后通过RT-PCR技术获得总cDNA。根据GenBank中关于米曲霉果糖基转移酶基因的相关数据，设计了米曲霉果糖基转移酶基因的特异性引物P-PEASY-S/P-EEASY-A和P-pPICZαB-A/P-pPICZαB-S。同时，利用分子克隆技术，PCR扩增得到了长度为1782bp的目的基因片段。将该片段连接至PMD-20T Vector上，获得了目的基因的原核重组菌DH5α/PMD20-Ftranse-bend和DH5α/PMD20-Ftranse-E/Xend。测序结果证实，目的基因与GenBank数据库中提供的序列有98.93%的相似度。以重组菌DH5α/PMD20-Ftranse-bend的为基础，将目的基因连接至原核表达载体pEASY-E1上，成功构建BL21-DE3/pEASY-Ftranse-bend重组菌株。在β-D半乳糖苷（IPTG）的作用下，诱导重组菌株进行表达，并使用SDS-PAGE蛋白质电泳技术初步鉴定，结果显示BL21-DE3/PMD20-Ftranse-bend重组菌株在诱导条件下表达出相对分子质量约为64KDa的重组蛋白。在对重组蛋白的诱导条件进行优化后，确定重组菌在IPTG浓度为1.0μmol/mL，诱导温度为25℃时，重组蛋白的表达量最高。利用重组蛋白上的6×组氨酸标签，使用蛋白质层析技术，获得了高度纯化的重组酶。通过催化蔗糖的反应，检测得到重组酶的酶活力达到59.0U/g。以重组菌DH5α/PMD20-Ftranse-E/Xend为基础，将目的基因连接至pPICZαB Vector上，并转化至毕赤酵母X-33细胞中，获得了X-33/pPICZαB-Ftranse-E/Xend重组菌。该重组菌为Mut+表型，可以以甲醇为唯碳源。通过对该重组菌的诱导，发现在发酵培养96h时，发酵液中的重组蛋白表达量达到最高,而发酵上清液的酶活达到14.9U/mL。