【摘 要】
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水稻类病变突变体在无明显逆境情况下自发出现细胞程序性死亡,这些突变体具有与超敏反应(HR)相似的生理生化特征,且其中部分突变体对病原物的抗病性较野生型得到提升。T34和T
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水稻类病变突变体在无明显逆境情况下自发出现细胞程序性死亡,这些突变体具有与超敏反应(HR)相似的生理生化特征,且其中部分突变体对病原物的抗病性较野生型得到提升。T34和T39为经EMS诱变获得的突变体,本文对T34突变基因进行了定位,并分析了T39的生理性状,主要研究结果如下:(1)组织化学染色结果显示,T34突变体出现了类似HR的细胞程序性死亡现象,属于类病变突变体。该突变体类病斑自幼苗时期在叶片处开始形成,并不断蔓延直至完全布满整个叶片及叶鞘,叶片衰老死亡。T34突变体对P3和P6两个白叶枯病菌生理小种的抗性较野生型有所提高,而对P2、P4、P5、P7、P8等的抗性无明显变化。(2)遗传分析表明T34突变表型受单隐性核基因控制。采用图位克隆技术将突变基因定位在12号染色体着丝粒附近360kb区域内。(3)结合对T34突变表型及候选基因定位区间,我们选择OsSL基因作为候选基因。测序分析发现该基因出现了单核苷酸位点突变,导致了 OsSL蛋白天冬氨酸残基突变为酪氨酸残基,而在其他多种植物物种中这一氨基酸残基相对保守,因此我们推测该突变性状很可能是由OsSL基因单核苷酸位点突变引起的。(4)组织化学染色结果表明T39突变体属于类病变突变体。该突变体类病斑自幼苗时期在叶片处开始出现,病斑的形成不受温度条件的影响,但需要光照条件的诱导,因此T39突变体属于起始型、环境敏感型类病变突变体。(5)实时荧光定量PCR检测发现PR1a、PR10、NH1等病程相关基因在T39突变体内表达水平远高于野生型。抗性鉴定试验发现,T39突变体对所接种的8个白叶枯病菌生理小种都呈现高抗病性,我们推测T39基因可能是水稻细胞程序性死亡和抗病反应的负调控因子。(6)遗传分析表明T39突变表型受单隐性核基因控制,这为T39基因的克隆奠定了基础。
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