目的肺癌是起源于支气管粘膜或腺体的恶性肿瘤,具有较高发病率及死亡率且逐年上升。肺癌目前的治疗方式主要有手术,化疗,放疗及靶向治疗。肺癌的治疗需要在明确病理诊断前提下进行,分化良好非小细胞肺癌根据镜下表现,不难进行分类鉴别明确诊断后治疗更精准化,分化差的非小细胞肺癌因镜下表现不典型,难以精确分型,免疫组织化学是根据免疫学原理,检测组织、细胞中抗原性物质的一种技术。这种方法特异性强,敏感性高,尤其是对疾病的鉴别诊断及辅助诊断起到决定性作用。本研究旨在探讨真实世界中TTF-1、CK7、P63、CK5/6免疫组化检测在低分化非小细胞肺癌的表达情况及亚分类中的应用,以期有利于低分化鳞癌、腺癌分类,为肺癌的优化精准治疗提供重要参考。方法采用回顾性研究方法,选取2019年9月至2021年12月因肺占位就诊于安徽医科大学第一附属医院、安徽医科大学第二附属医院、安徽省立医院最终纳入共104例经病理组织学确诊的低分化非小细胞肺癌,其中低分化腺癌62例,低分化鳞癌42例,根据国际癌症研究学会（IASLC）公布了第8版肺癌TNM分期,治疗前所有入组患者均经相应检查完成TNM分期。TTF-1表达于细胞核,阳性为棕黄色CK7表达于细胞膜,为棕黄色,CK5/6阳性表达位于细胞质和细胞膜,阳性表达为棕黄色.肿瘤细胞阳性率＞10%为阳性,未见肿瘤细胞为阴性。采用免疫组织SP法检测,镜下观察TTF-1、CK7、P63、CK5/6在不同细胞中的表达情况,比较真实世界中不同临床病理特征非小细胞肺癌中TTF-1、CK7、P63、CK5/6的表达差异及影响其阳性表达的因素。结果TTF-1、CK7在低分化腺癌中的阳性率分别为91.9%、93.3%、在低分化鳞癌中的阳性率分别为9.5%、23.1%;TTF-1、CK7阳性诊断低分化腺癌的灵敏度分别为87.88%、78.94%特异度分别为93.10%、95.83%;两者联合诊断低分化腺癌的灵敏度、特异度分别为90.91%、96.55%。CK5/6、P63在低分化鳞癌中的阳性表达率分别为92.9%和97.1%,在低分化腺癌的阳性率分别为11.1%,20.0%,CK5/6、P63阳性诊断低分化鳞癌的灵敏度分别为93.55%、83.33%,特异度分别为93.55%、96.15%;两者联合诊断低分化鳞癌的灵敏度、特异度分别为96.66%、90.91%。在年龄、性别、肿瘤病理类型及肿瘤大小层面TTF-1阳性表达的比较,差异有统计学意义＜0.05)。CK7、CK5/6、P63阳性表达在性别、及病理类型层面差异有统计学意义（p＜0.05）。余在肿瘤分期、肿瘤大小、有无淋巴结转移及有无远处转移方面比较,差异均无统计学意义（p＞0.05）。结论真实世界中TTF-1、CK7在低分化腺癌中高表达,两者联合检测有助于低分化腺癌的诊断,CK5/6、P63在低分化鳞癌中高表达,且两者联合检测有助于低分化鳞癌的鉴别诊断。免疫组化TTF-1、CK7、P63、CK5/6单独或联合检测阳性结果可作为低分化非小细胞肺癌的亚分类的鉴别诊断条件之一应用于临床。