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目的:通过检测肺小细胞癌和低分化鳞状细胞癌中促凋亡蛋白Smac(second mitochondrial activator of caspase)、抗凋亡因子Survivin、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达,探讨它们与临床病理指标及预后的关系,以期为临床诊断、治疗及预后判断提供新的理论依据。方法:应用免疫组化S-P法检测肺小细胞癌及低分化鳞状细胞癌中Smac、Survivin和PCNA蛋白的表达情况;应用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)定量检测两种癌组织中Smac、Survivin蛋白的表达;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常肺组织及两种癌组织中PCNA mRNA表达水平;运用统计软件SPSS 11.5对数据进行统计学分析。结果:1小细胞癌和低分化鳞状细胞癌生物学特性分析:32例小细胞癌与40例低分化鳞状细胞癌相比,其发病年龄较早(P<0.05),而临床分期较晚(P<0.05);两者淋巴结转移率分别为75.00%(24/32)、40.00%(16/40),脉管瘤栓阳性率分别为93.75%(30/32)、65.0%(26/40),差异均有显著统计学意义(P<0.05);性别、肿瘤最大径之间的比较无统计学意义(P>0.05)。对72例肺癌进行Kaplan-Meier单因素生存分析,小细胞癌与低分化鳞状细胞癌的三年生存率分别为31.25%(10/32)、65.00%(26/40),淋巴结转移阴性组与阳性组的三年生存率分别为87.50%(28/32)、20.00%(8/40),脉管瘤栓阴性组与阳性组的三年生存率分别为87.50%(14/16)、39.29%(22/56),经Log-rank时序检验证实差异均有显著统计学意义(P<0.05)。临床分期也与预后有关,分期晚的患者三年生存率低(P<0.05),但性别、年龄、肿瘤大小、支气管残端与预后无关(P>0.05)。经Cox多因素回归模型分析发现上述与预后有关的因素中只有分型及淋巴结转移是肺癌独立预后的指标(P<0.05)。2免疫组织化学检测结果:小细胞癌与低分化鳞状细胞癌中Smac蛋白高表达率分别为43.75%(14/32)、67.50%(27/40),Survivin蛋白阳性表达率分别为78.13%(25/32)、50.00%(20/40),差异均有显著统计学意义(P<0.05)。PCNA蛋白表达在这两种类型癌之间无明显的差别(P>0.05)。小细胞癌中PCNA蛋白表达与淋巴结转移有关,在转移阳性组其表达高于阴性组(P<0.05);PCNA表达与临床分期成正相关(r=0.381,P<0.05),但与患者的性别、年龄、肿瘤大小、脉管瘤栓无关(P>0.05);Survivin、Smac两蛋白表达与所研究各临床病理指标均无关(P>0.05)。低分化鳞状细胞癌中PCNA、Smac和Survivin蛋白表达均与淋巴结转移及脉管瘤栓有关,在阳性组PCNA和Survivin表达均高于相应阴性组(P<0.05),而Smac表达低于相应阴性组(P<0.05)。PCNA表达与临床分期成正相关(r=0.378,P<0.05);Smac表达也与临床分期有关,低表达组分期较晚(P<0.05);Survivin表达则与分期无关(P>0.05)。三蛋白表达均与患者性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。经Spearman等级相关分析证实,小细胞肺癌中,Smac、Survivin和PCNA的表达两两之间无相关性(P>0.05);低分化鳞状细胞癌中,Smac表达与Survivin、PCNA的表达均高度负相关(r=-0.378、P<0.05,r=-0.468、P<0.05),且Survivin与PCNA表达具有一致性(r=0.518、P<0.05)。3蛋白表达与预后:对72例肺癌进行K-M单因素生存分析,Smac蛋白高表达组三年生存率(70.73%)高于低表达组(22.58%)(P<0.05);Survivin蛋白阳性表达组三年生存率(31.11%),低于阴性表达组(81.48%)(P<0.05);PCNA表达也与预后有关,高表达者三年生存率低(P<0.05)。Cox多变量回归模型分析表明三者中只有Smac的表达是肺癌独立预后的指标(P<0.05)。对32例小细胞癌进行单因素回归生存率分析显示,影响预后的因子有:有无淋巴结转移(P<0.05)、PCNA蛋白表达(P<0.05)、Smac蛋白表达(P<0.05)及Survivin蛋白表达(P<0.05)。多因素多元回归分析显示,影响预后的因子有:有无淋巴结转移(P<0.05),Smac蛋白表达(P<0.05)。对40例低分化鳞状细胞癌进行单因素回归生存率分析显示,影响预后的因子有:有无脉管瘤栓(P<0.05)、有无淋巴结转移(P<0.05)、临床分期(P<0.05)、PCNA蛋白表达(P<0.05)、Smac蛋白表达(P<0.05)及Survivin蛋白表达(P<0.05)。Cox多因素回归模型分析显示影响预后的因子有:有无淋巴结转移(P<0.05)、PCNA蛋白表达(P<0.05)、Smac蛋白表达(P<0.05)。4流式细胞术检测结果:小细胞癌与低分化鳞状细胞癌中Smac蛋白相对含量分别为(523.58±63.96)、(554.95±47.54),Survivin蛋白相对含量分别为(622.52±47.33)、(591.47±63.46),差异均有统计学意义(P<0.05)。小细胞癌中Smac蛋白表达低于低分化鳞状细胞癌,而Survivin蛋白表达高于低分化鳞状细胞癌,此结果与免疫组化结果一致。小细胞癌中, Smac与Survivin两蛋白的表达水平均与患者的性别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、脉管瘤栓及临床分期无关(P>0.05)。该结果与免疫组化检测结果相一致。低分化鳞状细胞癌中,淋巴结转移组与非转移组Smac蛋白的相对含量分别为(535.88±44.98)、(567.66±45.73),Survivin蛋白的相对含量分别为(620.60±48.24)、(572.05±65.78);脉管瘤栓阳性组与阴性组Smac蛋白的相对含量分别为(542.57±42.90)、(577.94±48.64),Survivin蛋白的相对含量分别为(607.35±56.80)、(561.98±66.62);差异均具有显著统计学意义(P<0.05)。两蛋白各自的表达水平与患者的性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。上述结果与免疫组化结果一致。但两蛋白的表达水平均与临床分期无关(P>0.05),这一点免疫组化结果不一致。5 RT-PCR检测结果:正常肺组织中PCNA mRNA有低水平表达,小细胞癌及低分化鳞状细胞癌中其表达均显著增高。小细胞癌中PCNA mRNA的表达稍高于低分化鳞状细胞癌,但差别不明显,此结果与免役组化结果相一致。结论:1淋巴结转移可作为肺小细胞癌与低分化鳞状细胞癌独立预后指标。脉管瘤栓、临床分期可作为判断两者预后的参考指标。小细胞癌与低分化鳞状细胞癌相比,发病年龄早,易发生淋巴结及血行转移,临床分期晚,预后也差。2 Smac在小细胞癌中的表达明显低于低分化鳞状细胞癌,其低表达提示生存率低,故进一步预示小细胞癌的预后差于低分化鳞状细胞癌。Smac可作为小细胞癌独立预后指标。Smac低表达与低分化鳞状细胞的淋巴结、血行转移及临床分期有关,也可作为低分化鳞状细胞癌独立预后因素。3 Survivin在小细胞癌中的表达明显高于低分化鳞状细胞癌,其高表达提示生存率低,但不能作为独立预后的指标,可作为判断预后的参考指标。在低分化鳞状细胞癌中Survivin的表达与淋巴结转移有关,高表达预示易发生转移,Survivin可结合淋巴结转移来判断预后。4 PCNA的表达在小细胞癌与低分化鳞状细胞癌之间无明显的差别,提示两种类型的肺癌在增殖能力上可能不存在差异。小细胞癌与低分化鳞状癌中,PCNA的表达与淋巴结转移及临床分期均有关,增殖活性高的肿瘤易发生转移,其临床分期也晚。PCNA可以作为判断低分化鳞状细胞癌独立预后的指标。在小细胞癌中PCNA高表达提示低生存率,可以作为判断预后的参考指标。5低分化鳞状细胞癌中,PCNA的表达与Survivin的表达成正相关,而与Smac的表达成负相关。表明Survivin高表达及Smac低表达均可以促进转化细胞的增殖,这就进一步扩大了细胞增殖与凋亡之间的差距,使肿瘤细胞获得生长优势。Smac与Survivin的表达显著负相关提示前者对后者的表达可能有负反馈调节作用。