琼玉膏和DES干预HBxAg致HCC的机理研究

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背景:肝细胞癌是人类主要的恶性肿瘤之一,中医药在防治肝癌中有着不可替代的作用,但是其防治肝癌机理并不清楚。我们应用实验的方法来研究中医药在防治恶性肿瘤中的作用。目的:通过乙肝病毒x蛋白(Hepatitis B x antigen,HBxAg)促进肝癌的发生及琼玉膏和番荔枝内脂(Desacetyluvarici,Des)对其影响的研究,来探讨琼玉膏和Des防治肝癌病变机理,以及研究HBxAg在诱导肝癌发生过程中的机制。方法:四噻唑蓝(Dimethylthiahiazo phenytetrazoliumromide,MTT)法测定琼玉膏和Des对HepG2.2.15和HepG2细胞株是否具有抑制作用,如有作用测定其生长曲线。免疫细胞化学方法测定HBxAg的蛋白表达。流式细胞仪测定琼玉膏和Des对HepG2.2.15和HepG2细胞株的细胞周期和细胞凋亡的影响。PT-PCR的方法检测凋亡基因Fas,检测固有免疫通道Toll4的表达情况。结果:Des的细胞生长抑制率为62.2%,琼玉膏则没有抑制作用。Des对细胞周期也有明显的作用。各组诱导细胞凋亡有差别,顺铂(Cisplatin,DDP)组和Des组两组之间没有差别,正常组、琼玉膏组、HpG2组没有统计学意义。Des通过诱导Fas基因的表达来诱导细胞凋亡。琼玉膏对HpG2.2.15细胞株的HBxAg基因表达没有影响,而DDP和Des则明显的干预了HBxAg基因表达。琼玉膏增强了Toll4基因的表达,有诱导先天免疫增强的作用。DDP也有增强Toll4的作用,但其表达低于琼玉膏。Des也有增强Toll4的作用,但是其作用明显低于琼玉膏和DDP。结论:1通过实验证实了琼玉膏治疗肝细胞癌的作用机制,是通过固有免疫通道的激活和促进Toll4基因的表达来起作用。琼玉膏对HBxAg没有作用。2通过实验证实Des对肝癌细胞细胞周期有明确的影响,促进凋亡基因的表达和抑制HBxAg的表达。3 HBxAg在诱发肝癌中的机制可能是通过固有免疫通道起作用。HBxAg具有抑制细胞凋亡的作用。
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