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目的:采用STZ糖尿病肾病(DN)大鼠模型观察DN发生发展过程中是否存在足细胞上皮-间充质细胞转分化及中药清热益气化瘀通络复方对这一过程的作用。 方法:运用STZ对Wistar大鼠造模,建立正常对照组(n=7)、DN模型组(n=6)、清热益气化瘀通络中药组(n=6)、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂厄贝沙坦组(n=6),干预12周后检测大鼠血糖、血肌酐、尿素氮、24h尿蛋白定量,应用免疫组学法结合计算机图像分析检测各组大鼠足细胞上皮细胞标志WT1、P-Ca及间充质细胞标志α-SMA、desmin阳性面积比及积分光密度,同时应用实时定量RT-PCR法检测WT1、P-Ca、desmin mRNA的表达。 结果:①实验结束时各组间生化指标比较:DN模型组、中药组与厄贝沙坦组血糖均较正常对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05),但三组间比较差异无统计学意义(P>0.05);正常对照组、DN模型组、中药组、厄贝沙坦组四组间血肌酐、尿素氮测值比较无统计学差异(P>0.05);24h尿蛋白定量比较,DN模型组、中药组与厄贝沙坦组均较正常对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05),与DN模型组相比,中药组、厄贝沙坦组24小时尿蛋白定量有所下降,差异有统计学意义(P<0.05),且中药组较厄贝沙坦组下降更明显,差异有统计学差异(P<0.05)。②WT1:四组间WT1肾小球阳性信号面积比、积分光密度、肾皮质WT1 mRNA表达、WT1 mRNA的相对定量无统计学差异(P>0.05)。③P-Ca:正常对照组P-Ca肾小球阳性信号面积比、积分光密度、肾皮质P-Ca mRNA表达、相对定量均最高,DN模型组最低,中药组、厄贝沙坦组高于DN模型组(P<0.05),中药组与厄贝沙坦组间无统计学差异(P>0.05),除阳性面积比外,其他指标与正常对照组比较无差异(P>0.05)④α-SMA:DN模型组阳性信号面积比、积分光密度最高,中药组、厄贝沙坦组低于DN模型组和正常对照组,与DN模型组比较有统计学差异(P<0.05),与正常对照组比较无统计学差异(P>0.05);中药组与厄贝沙坦组间比较无统计学差异(P>0.05)。⑤DES:DN模型组肾小球阳性信号面积比、积分光密度、mRNA表达、相对定量最高,正常对照组最低,中药组、厄贝沙坦组低于DN模型组(P<0.05);高于正常对照组,但无统计学差异(P>0.05);中药组与厄贝沙坦组间无统计学差异(P>0.05)。⑥相关性分析:24h尿蛋白定量与WT1积分光密度无相关性(r=-0.337,P>0.05),与P-Ca积分光密度呈负相关(r=-0.600,P<0.05);与α-SMA肾小球内积分光密度呈正相关(r=0.420,P<0.05),与DES肾小球内积分光密度呈正相关(r=0.750,P<0.01)。 结论:①早期STZ造模DN大鼠(12周)足细胞数目尚无明显减少时,尿中蛋白已明显增加;②伴随此期DN蛋白尿发生,足细胞P-Ca的表达降低、α-SMA及DES的表达升高;并且,尿蛋白含量与足细胞P-Ca的表达降低、α-SMA及DES的表达升高有相关性;③DN大鼠(12周)足细胞可能存在EMT;④清热益气化瘀通络复方可降低DN大鼠24h尿蛋白定量,并增加足细胞P-Ca的表达而降低α-SMA及DES的表达,显示具有拮抗DN大鼠EMT的作用。