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原发性肝细胞肝癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)是常见致死性恶性肿瘤之一,全球范围内每年约有50万肝癌新发患者。原发性肝细胞肝癌位居我国恶性肿瘤致死率第二位,每年全球新发肝癌病例中超过一半发生于中国。如今,尽管肿瘤检出率得到明显提高,临床治疗策略也日益完善,但是因为肝癌极易发生复发和转移,所以肝癌患者总的生存时间不长,因此,积极寻找一种能够早期预测并能够评估肝癌预后的分子十分重要。趋化因子研究是当今医学的热点之一。CC趋化因子受体2(CC chemokine receptor2,CCR2)是单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractic protein-1,MCP-1/CCL2)的特异受体,但同时也是CCL7、CCL8、CCL11、CCL12、CCL13的受体。CCR2包括CCR2A与CCR2B两个亚型,二者分别来源于同一基因的不同剪切,仅羧基端不同,但CCR2B是主要的功能形式。最新研究表明,CCR2在前列腺癌、肾细胞癌、非小细胞肺癌、骨髓瘤细胞、直肠癌等多种肿瘤细胞中异常表达,并与肿瘤的侵袭、转移相关,但CCR2与肝细胞肝癌的关系仍待阐明。目的:明确CCR2分子在人肝癌组织中的表达及该分子与肝癌的临床病理特征之间的关系,了解CCR2在不同侵袭能力的肝癌细胞系和正常肝细胞系中的表达,然后用CCR2特异性siRNA转染HepG2及MHCC97-H细胞系,进一步阐明CCR2分子对不同肝癌细胞系侵袭能力的影响及可能的机制。方法:对76例肝癌及癌旁组织进行免疫组化染色,了解CCR2在上述组织中的表达情况,并结合肝癌的临床病理资料对其进行进一步分析。体外实验中,首先检测HepG2、SMMC-7721和MHCC97-H三种肝癌细胞系和一种正常肝细胞系HL-7702中CCR2蛋白的表达,设计并合成CCR2特异性小干扰RNA片段(small interfering RNA, siRNA),对HepG2及MHCC97-H肝癌细胞系进行特异性siRNA转染。然后再检测转染后细胞中CCR2蛋白和mRNA水平的变化。最后,采用Transwell小室基质胶侵袭实验检测HepG2和MHCC-97H肝癌细胞系在CCR2-siRNA转染前后细胞体外侵袭能力的变化情况,并检测两种细胞系转染前后MMP-2的表达及蛋白活性的变化。结果:免疫组化提示,CCR2主要在细胞膜上呈现阳性染色,胞浆中也有少量表达,染色呈棕色及棕黄色颗粒样。在肝癌组织中,CCR2染色结果15(19.7%)例阴性表达,29(38.2%)例弱阳性表达,12(15.8%)例中等阳性表达,20(26.3%)例强阳性表达;在癌旁组织中,仅14(18.4%)例显示为弱阳性表达,其余均为阴性。CCR2在肝癌组织中的表达明显高于相应的癌旁组织。肝癌组织中CCR2阳性表达与肿瘤直径、门静脉癌栓、转移、AJCC分期(χ2=12.41,P<0.001;χ2=7.476,P=0.006;χ2=7.227,P=0.007;χ2=20.711,P<0.001)明显相关,而与肝癌患者的性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤数量、肿瘤分化、卫星灶、AFP表达量(χ2=0.215,P=0.643;χ2=0.038,P=0.845;χ2=0.974,P=0.323;χ2<0.01,P=1.000;χ2=3.665,P=0.056;χ2=2.951,P=0.086;χ2=0.026,P=0.873)无明显相关。对76例患者的生存资料进行Kaplan-Meier生存分析得出,CCR2高表达的患者生存时间及生存率均低于CCR2低表达的患者,两者的差异具有统计学意义(χ2=27.133,P<0.01)。并对所有临床资料进行单因素及多因素Cox回归分析,单因素分析结果显示,CCR2的高表达、转移、门静脉癌栓、肿瘤直径、卫星灶、肿瘤数量、AJCC分期(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P=0.004,P=0.023,P=0.028,P<0.01)均是影响肝癌患者总体生存的风险因素;而多因素分析结果显示,CCR2的高表达、肿瘤直径、转移、门静脉癌栓、肿瘤数量(P=0.006,P=0.023,P<0.01,P=0.002,P=0.001)才是影响肝癌患者总体生存的独立危险因素。CCR2在肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721和MHCC97-H中呈相对高表达。转染后的HepG2和MHCC97-H细胞中CCR2蛋白及mRNA水平均明显下调。再对这两种细胞行Transwell小室基质侵袭实验后发现这两种细胞穿透Transwell小室膜的细胞数目显著减少。Western-blot及ELISA检测发现,CCR2-siRNA组两种细胞的MMP-2表达和活性也明显下降。结论:CCR2与肝癌的侵袭转移相关,肝癌细胞系HepG2和MHCC97-H的侵袭能力可以被特异性的CCR2-siRNA有效抑制,并可以下调MMP-2的表达及活性,提示CCR2可以调控肝癌的侵袭转移,并且这一过程可能是通过对基质金属蛋白酶的调控来实现。