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目的:研究槐杞黄颗粒对阿霉素肾病大鼠肾脏氯离子通道蛋白ClC-5表达的影响,探讨槐杞黄颗粒在阿霉素肾病中对氯离子通道的作用。 方法:48只健康普通级wistar大鼠,按随机数字表法分为3部分,共计5组,第一部分空白对照组12只、第二部分造模非干预组18只、第三部分造模干预组共18只,将其分为三组,即甲强龙组6只、槐杞黄组6只及甲强龙+槐杞黄组6只。其中造模非干预组、甲强龙组、槐杞黄组及甲强龙+槐杞黄组给予盐酸多柔比星6mg/kg(3ml/kg)尾静脉一次性注射造模,空白对照组给予等量生理盐水注射。分别于造模后2周、4周、6周测24小时尿中的蛋白含量并记录。造模2周后造模非干预组大鼠随机挑选6只,留取肾脏组织,待测免疫组化。甲强龙组、槐杞黄组及甲强龙+槐杞黄组大鼠收集24小时尿液,尿蛋白定性试验(试纸条法)<3+的大鼠给予剔除,符合条件的大鼠甲强龙组给予注射用甲泼尼龙琥珀酸钠(甲强龙)10mg/kg(2.5ml/kg)腹腔注射,槐杞黄组给予槐杞黄颗粒2g/kg(2ml/kg)灌胃,甲强龙+槐杞黄组同时给予注射用甲泼尼龙琥珀酸钠(甲强龙)10mg/kg(2.5ml/kg)腹腔注射及槐杞黄颗粒2g/kg(2ml/kg)灌胃,空白对照组及造模非干预组给予等量生理盐水腹腔注射,共4周。造模4周后,空白对照组及造模非干预组分别随机处死6只大鼠,测相关生化指标,留取肾脏组织,用电镜及光镜观察肾脏组织形态学的变化。造模6周后,即实验结束时5组大鼠,每组6只,共30只,测相关生化指标,留取肾脏组织,电镜及光镜下观察形态学变化,通过免疫组化观察肾脏氯离子通道蛋白ClC-5的变化。 结果:与空白对照组比较,造模2周时造模非干预组大鼠出现大量的蛋白尿(P<0.01),4周时达到高峰,血清白蛋白明显减少(P<0.01)。造模4周、6周时,甲强龙组与甲强龙+槐杞黄组24小时尿蛋白无明显差异(P>0.05),与造模非干预组比较均明显降低(P<0.01);槐杞黄组分别与甲强龙组、甲强龙+槐杞黄组比较,24小时尿蛋白相对较多(P<0.05),但与造模非干预组比较亦明显降低(P<0.01)。电镜下观察,与空白对照组比较,造模4周时造模非干预组肾小球足细胞足突排列紊乱,广泛的消失或变平坦,内皮细胞出现肿胀,窗孔减少,肾小管上皮细胞肿胀,部分脱落。免疫组化显示,造模2周时(治疗前)造模非干预组近端肾小管ClC-5表达下调(P<0.05),造模6周时(治疗后)甲强龙组、甲强龙+槐杞黄组肾小管ClC-5表达较造模非干预组上调(P<0.05),与正常对照组比较无明显差异(P>0.05),组间比较甲强龙组与甲强龙+槐杞黄组无差异(P>0.05)。造模6周时(治疗后)槐杞黄组与造模非干预组比较肾小管ClC-5表达无明显差异(P>0.05)。 结论:1.阿霉素诱导大鼠尿蛋白2周时明显增多,于4周时达到峰值。 2.4周时造模非干预组大鼠电镜下可见肾小球足突融合严重,排列紊乱,内皮细胞肿胀,窗孔较少,肾小管上皮细胞肿胀,部分脱落,管腔炎症细胞浸润,与临床上微小病变型肾病病理表现类似。 3.随着尿蛋白的增多,肾小管ClC-5蛋白的表达下调,经单用糖皮质激素治疗、或经糖皮质激素+槐杞黄联合治疗后的大鼠尿蛋白明显减少,肾小管ClC-5蛋白的表达上调;经槐杞黄治疗后的大鼠尿蛋白亦减少,但肾小管ClC-5蛋白的表达无明显变化。