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目的:通过研究益气补肾方对糖尿病小鼠肾损伤的保护作用,探讨其可能的作用机制,以期为糖尿病肾损伤提供中医药治疗的实验依据。方法:健康雄性C57BL/6J小鼠,体重25g±2g,随机分为正常对照组20只、造模组60只。造模方法为:连续5天腹腔注射柠檬酸钠溶液稀释的1%链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)溶液,用药剂量为60mg/kg/d,通过此方法诱导造模组小鼠产生糖尿病。正常对照组小鼠,根据STZ用药的剂量、体积,腹腔注射相应同体积的无菌柠檬酸盐缓冲液(PH 4.5),浓度为0.1mmol/L。将造模成功的糖尿病小鼠分成模型组、中药低剂量组、中药高剂量组,每组各20只。中药低、高剂量组分别给予益气补肾方800mg/kg/d、200mg/kg/d灌胃,模型组及正常对照组灌胃等量蒸馏水,连续8周。实验期间,按时称重、测量末梢血糖,并观察小鼠皮毛色泽、饮食、大小便、生活状态等基本情况。第8周末收集尿液及血液样本,以备后期检测各项指标;取肾组织并称重、记录,计算肾重/体重比值;小鼠左肾石蜡包埋并切片,进行HE染色、PAS染色,观察肾脏病理形态变化,并进行PPARD的免疫组织化学染色;右肾冻存-80℃后进行qRT-PCR实验,观察糖尿病小鼠肾脏PPARD mRNA的表达。结果:1、一般状态:模型组小鼠多饮、多食、多尿等糖尿病临床表现明显,毛色灰暗粗糙,黯淡无光泽。中药高、低剂量组小鼠也有类似表现,但与模型组相比,均得到不同程度的改善。2、肾重体重比:与正常对照组比较,模型组小鼠肾重体重比显著升高(P<0.01);与模型组相比,中药高、低剂量组均显著降低(P<0.01)。3、常规指标:(1)肾功能:与正常对照组相比,模型组小鼠尿Glu水平显著升高(P<0.01),Ucr含量增加;血清BUN、Scr显著升高(P<0.01)。与模型组相比,中药高、低剂量组小鼠尿Glu均降低;Ucr水平均降低,但中药低剂量组更显著(P<0.01);血清BUN、Scr均降低,其中中药高剂量组降低幅度更大(P<0.05)。(2)血脂水平:与正常对照组组比,模型组小鼠TC、TG水平显著升高(P<0.01)。与模型组相比,中药高、低剂量组TC水平均下降(P<0.05);TG含量均降低,但中药高剂量组更为显著(P<0.01)。4、肾组织染色:HE、PAS染色可见模型组小鼠出现肾小球硬化肥大,系膜区及系膜细胞、肾小球壁层上皮增生,基质结节弥漫,基底膜增厚;肾小管及肾间质纤维化,部分肾小管萎缩,可见透明管型,肾小管基底膜增厚,肾细小动脉玻璃样变等病理改变。与模型组相比,中药高、低剂量组病理表现都在不同程度上减轻。5、qRT-PCR结果:与正常对照组相比,模型组小鼠肾脏组织中PPARD mRNA表达显著降低(P<0.01)。与模型组相比,中药高剂量组肾脏组织中PPARD mRNA表达升高,且有统计学差异(P<0.05);中药低剂量组表达升高,但未见统计学差异(P>0.05)。6、免疫组织化学:与正常对照组相比,模型组小鼠肾脏组织PPARD表达明显减少(P<0.01)。与模型组相比,中药高剂量组小鼠肾脏PPARD表达增加,有统计学差异(P<0.05);中药低剂量组表达增加,但未见统计学差异(P>0.05)。结论:1、益气补肾方能改善糖尿病小鼠一般状态、实验室指标、病理改变,减轻糖尿病小鼠肾损伤。2、益气补肾方对糖尿病小鼠肾损伤发挥保护作用,其机制可能通过调节PPARD的表达有关。