农杆菌介导的口蹄疫抗原决定簇融合基因转化胡萝卜的研究

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本文通过农杆菌的介导,以携带O 型和A 型口蹄疫抗原决定簇融合基因O21- O14 -A21-HBcAg 的植物表达载体转化胡萝卜愈伤组织;通过筛选获得潮霉素抗性愈伤组织,并再生得到抗性植株;对转化后的愈伤组织和抗性植株进行了GUS 基因活性组织化学染色检测,并且对抗性植株进行了PCR 、PCR-Southern 、RT-PCR 等分子生物学检测。所获得的试验结果如下:建立了胡萝卜东大品种再生系统。最佳愈伤组织诱导培养基为MS + 2,4-D 0.1 mg/L ,分化培养基为不加任何激素的MS 培养基,生根培养基为1/2MS +NAA 0.2 mg/L;通过筛选,再生获得156 棵抗性植株。建立并优化了农杆菌介导的胡萝卜的遗传转化系统;对抗性植株进行PCR 检测和PCR-Southern 杂交检测,证实的基因已经成功整合到胡萝卜基因组中。
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