分离纯化、结构及抗氧化活性研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:doudou2008
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
余甘(Phyllanthus emblica L.)是大戟科叶下珠属植物,是世界卫生组织指定在世界范围内推广种植的3种保健植物之一,2002年被我国卫生部确定为药食两用植物,是我国的传统民族用药。余甘多糖是余甘的主要活性成分,具有抗肿瘤和抗氧化生物活性。目前对余甘多糖的研究主要侧重于精多糖药理活性探索,对其活性级分及结构研究较少,且不够深入。   本文以余甘主栽品种“粉甘”果实为研究对象,对余甘多糖的提取技术、分离纯化方法、结构信息以及多糖抗氧化活性进行了系统研究,研究结果如下:   从余甘中提取出粗多糖,其糖含量为31.13[%];粗多糖经冻融分级、脱色素、除蛋白、透析和凝胶柱层析等初步分级纯化后,得白色丝状余甘精制多糖EPS,多糖收率10.33[%];EPS的化学组成为:中性糖61.67[%],糖醛酸26.04[%],蛋白质1.98[%],中性糖由Gal、Rha、Ara、Glc、Xyl和少量Man组成,糖醛酸为GalA。   研究了余甘多糖的超声波强化提取和微波辅助萃取工艺。超声波提取最佳工艺参数:超声波提取温度80 ℃、超声波时间70 min、超声波功率475 W、料液比1:20;微波前处理-热水浸提法最佳工艺参数:微波前处理功率480W,微波处理时间60s,热水浸提温度90℃,浸提时间4h。   对水提余甘精多糖的分级纯化方法和化学组成进行了研究。EPS经DEAE-Sepharose CL-6B柱层析分级后得到2个多糖级分EPS1和EPS2;EPS1为中性多糖,经HPGFC分级后得到2个多糖级分EPS1-1和EPS1-2;EPS2为分子量均一的酸性多糖,;EPS1-1、EPS1-2和EPS2分别占总洗脱量的3.39[%]、19.60[%]和77.01[%],总回收率92.32[%]。   EPS1-1是一种中性多糖,相对分子质量约为123 Kda,纯度98.53[%],总糖95.09[%],主要由Gal、Glc组成;EPS1-2总糖含量96.66[%],纯度98.91[%],分子量约为15 Kda,是一种中性多糖,主要由Gal、Glc和Xyl组成;IR光谱显示EPS1-1和EPS1-2是β构型的吡喃醛糖。   EPS2是一种酸性多糖,含有79.01[%]的半乳糖醛酸,总糖含量97.53[%],相对分子质量约为140 Kda,纯度98.96[%],主要由GalA、Gal和Rha组成,还有少量的Ara;单糖组成结合IR图谱确定EPS2是一种果胶多糖,多糖分子以α-糖苷键为主,并含有一定量的β-糖苷键。   应用NMR、GC-MS、FT-IR、GC、HPLC 等仪器分析技术,配合部分酸水解、甲基化分析等经典化学方法研究了余甘多糖EPS1-2和EPS2的化学结构。   EPS1-2的结构特征为:糖残基构型主要是1,4-,1,6-β-D-Galp、T-,1,4-,1,3,6-β-D-Glcp以及1,3,6-,1,2-β-D-Manp;主链由Galp和Glcp连接形成半乳葡聚糖,(1→)-β-D-Glcp为主链的非还原性末端残基,主链每五个糖残基中有一个分支;由1,6-β-D-Glcp通过O-3位与1,3,6-,1,2-β-D-Manp等中性糖侧链相连;Manp残基处于支链位置,1,3,6-Manp处于支链的核心区域。EPS1-2主要由β-构型构成,含有少量α-构型。部分糖残基被乙酰基取代。EPS1-2重复结构单位可能为:   EPS2一种典型的果胶多糖,主链由1,4-D-GalpA线性连接形成半乳糖醛酸聚糖,由1,4-D-GalpA通过O-4位与1,2-、1,2,4-L-Rhap的O-1位交替连接形成含有较多分支的鼠李糖半乳糖醛酸聚糖。半乳糖醛酸聚糖链部分羧基被甲酯化,部分O-2或O-3位被乙酰基取代。T-、1,6-、1,3,6-α-Galp和T-、1,5-α-Araf聚合形成的阿拉伯半乳聚糖以及半乳聚糖是EPS2侧链的主要组成,通过Rhap残基的O-4位与主链相连。T-α-GalpA、T-α-L-Araf和T-β-Galp位于非还原性末端。   通过检测EPS、EPS1、EPS1-2和EPS2对羟基自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基的清除能力以及抗脂质过氧化和还原能力,对余甘多糖的体外抗氧化活性进行了研究,并与阳性对照BHT进行比较。结果表明,EPS1-2和EPS2均表现出很强的抗氧化活性,各级分多糖的抗氧化活性大小为EPS2>EPS1-2>EPS1>EPS,均多糖的活性大于杂多糖;EPS2的还原能力强于BHT。   酸性多聚糖EPS2的抗氧化活性高于中性多聚糖EPS1-2和EPS1,这与酸性多糖含有较多的带负电荷的糖醛酸有关;EPS1-2的抗氧化活性强于EPS1,表明多糖的抗氧化活性与分子量大小有关;多糖的糖单元类型、糖苷键构型、取代基、空间结构等结构因素也是影响多糖抗氧化活性的主要因素。
其他文献
化学是一门以实验为基础的学科,研究化学的主要手段是实验.化学的许多重大发现和研究成果都是通过实验得到的.因此,如何引导学生顺利的进行化学实验,培养学生良好的实验习惯,
皮皮豬卡通 编绘  楚人有生而不识姜者,曰:“此从树上结成。”或曰:“从土里生成。”此人固执己见,曰:“请与子以十人为质,以所乘驴为赌。”已而遍问十人,皆曰:“土里生也。”其人哑然失色曰:“驴则付汝,姜还树生。”——明·江盈科《雪涛谐史》
期刊
<正> 电视新闻作为电视台的“拳头节目”,总是在收看率最高的“黄金时间”里受到亿万观众的青睐。从中央电视台的“新闻联播”到全国各省、市、自治区电视台的新闻节目,在传递信息、交流思想、沟通感情、舆论引导等方面发挥着极其重要的作用。作为每天在电视新闻节目中与观众见面的播音员来说,其权威性、信赖感、知名度等也常常是在播报新闻时建立的。新闻是广播电视的主体,这是广播电视的性
“导思-点拨”法是当下教师进行课堂教学的一种新型的教学方式.“导思-点拨”是遵循以学生为学习主体地位原则的一种具体教学实践,在教学设计和教学安排上,“导思-点拨”法注
春节,我从万里之遥的英伦三岛回到了北京。“开放的中国盼奥运”,无论是在熙熙攘攘的繁华大街的巨幅广告牌上,还是在穿行于民宅巷尾的出租汽车的玻璃窗上,这样的字眼俯拾皆
枇杷具有重要的研究价值,但枇杷仍无稳定的离体再生体系。本文研究了不同品种的枇杷种子萌发情况,影响种子萌发的因素以及贮藏对种子萌发的影响并优化了枇杷种子无菌萌发的消毒
本文对MOOC和混合式学习两种学习方式的发展历程、内涵特点进行了综述,指出混合式学习是MOOC的升级和优化,推动高等教育信息化发展的核心趋势.
新课程理念提倡学生为主体、教师为主导的教学理念,教师应充分调动学生的积极性.小学语文阅读教学所占比重较大,提高其质量成为深化小学教育改革的重要环节.本文针对目前我国
小学数学教材中有大量的规则类知识,这是因为小学阶段处于给学生打下坚实的数学基础的重要时期,学生需要对于各类最基本的规则有良好的认识.因此,在这个时期做好规则类知识的