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紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum)为多年生草本植物,原产美洲的墨西哥至哥斯达黎加一带,现已广泛分布在世界热带和亚热带的多个国家和地区。紫茎泽兰适应力强,传播速度快,是一种恶性外来入侵杂草,作为重要的外来入侵物种,给共生的其它植物带来了非常大的灾难。目前,紫茎泽兰作为一种有害的外来入侵杂草,至少对30个国家造成了环境与生态的危害。该植物已经成中国最重要外来入侵植物,并广泛分布于重庆、四川、贵州、云南、西藏、广西、河北和台湾等,严重破坏了当地的生态环境。近年来,已有研究人员意识到紫茎泽兰可以开发为植物源的杀虫剂,充分利用这一外来有害植物,变害为宝。本研究利用紫茎泽兰提取物作为天然药物,对动物寄生螨病进行防治研究,同时对紫茎泽兰提取物中的杀螨活性成分进行分离和鉴定。主要研究成果如下:1、紫茎泽兰乙醇提取物对兔疥螨和兔痒螨的离体杀灭效力研究采用水煎煮、乙醇热回流以及水蒸汽蒸馏三种方法提取了紫茎泽兰的植物成分,并在实验室以离体浸杀的的方式研究了紫茎泽兰95%乙醇提取物对兔疥螨和兔瘁螨的离体毒力效力。结果表明,紫茎泽兰乙醇热回流提取物对供试的兔瘁螨和兔疥螨均具有较强的毒力效力。4h内0.5 g/ml-1.0 g/ml浓度的紫茎泽兰乙醇热回流提取物能杀灭全部供试疥螨,1.0 g/ml浓度的提取物能杀灭全部供试痒螨。0.25-1.0 g/ml浓度的提取液对兔疥螨,0.5 g/ml-1.0 g/ml浓度提取液对兔瘁螨具有较强的毒力效力。统计发现,在1h内紫茎泽兰提取物对兔疥螨的半数致死浓度LC50为0.22 g/ml,对兔痒螨的LC50则为0.64 g/ml。2、紫茎泽兰乙醇提取物对兔痒螨病的临床治疗研究从暴发兔痒螨病的养殖场随机挑选30只年龄、体重以及左耳和右耳瘁螨感染程度相近的新西兰兔,在30 d的临床治疗期内,随机将患病新西兰兔分成5个组(分别命名为A、B、C、D、E组),每组6只,A、B、C三个试验组分别采用1.0、0.5、0.25 g/ml(w/v)的紫茎泽兰乙醇提取物进行涂擦治疗,D和E两组分别采用伊维菌素(注射)、丙三醇加水(涂擦)作为阳性和空白对照。临床治疗结果表明,三个不同浓度的紫茎泽兰乙醇提取物均对兔痒螨病治疗效果显著,第一次用药7d后,1.0、0.5、0.25 g/ml(w/v)三个浓度试验组18只新西兰兔左、右耳道的痒螨均被完全消除,0.25 g/ml(w/v)浓度组个别感染新西兰兔耳道存在刺激、炎症等现象也在第2次用药后缓慢消失。统计结果表明,对取走耳内痂皮的左耳与未取痂皮的右耳感染部位,用药后均取得良好效果,统计结果无差异(P<0.05)。用药2次后,直到30d的治疗期结束,紫茎泽兰乙醇提取物治疗组新西兰兔完全恢复,无复发现象,结果表明紫茎泽兰乙醇提取物对兔痒螨病具有较好的临床治疗效果。3、紫茎泽兰乙醇提取物对兔疥螨病的临床实验研究评估了紫茎泽兰乙醇提取物对兔疥螨病的临床治疗效果,分别用1.0、0.5、0.25g/ml(w/v)三个不同浓度的紫茎泽兰乙醇提取物对自然感染疥螨以及人工感染疥螨的新西兰兔进行分组治疗。结果表明,用1.0、0.5 g/ml(w/v)两个浓度治疗的试验组24只新西兰兔外耳缘、感染脚趾部位的疥螨均被完全消除。用药2次后,直到30d的治疗期结束,紫茎泽兰乙醇提取物治疗组新西兰兔恢复良好,无复发现象。在第14 d,1.0、0.5、0.25g/ml(w/v)浓度的治疗组新西兰兔脚趾部位感染的治疗恢复评分从4.50、4.25、4.32减少到0.77、0.87、3.83;新西兰兔外耳缘的感染程度也分别从4.55、4.45、4.18到0.73、0.87和3.90。在第14d检查发现,1.0、0.5 g/ml(w/v)两个浓度治疗的新西兰兔在脚趾部分没有检出螨虫。结合前期的、试验,体外杀螨试验与临床治疗结果均预示紫茎泽兰具有杀灭兔疥螨的活性成分,可以作为植物源性中草药加以开发利用。4、紫茎泽兰石油醚萃取物对牛足螨的杀灭效果及杀虫活性成分初步分析采用三种不同浓度的紫茎泽兰乙醇提取物以及紫茎泽兰乙醇提取物的石油醚萃取物对牛德州足螨进行离体杀灭试验,评估不同浓度提取物对牛足螨的离体杀灭效果。同时,从三个奶牛场选取24头感染足螨的荷斯坦奶牛,随机分成4组(A、B、C和D组,每组6只),A和B组用石油醚萃取物涂擦治疗,C和D组分别用氰戊菊酯(阳性对照)、丙三醇加水(1:1,空白对照)涂擦治疗。结果表明,在离体杀灭试验中,4h内,1.0、0.5、0.25 g/ml(w/v)浓度的乙醇提取物杀灭效果分别达到100%、100%和96.7%,O.1ml/ml、0.05ml/ml、0.025ml/ml(v/v)三种不同浓度的石油醚萃取物杀灭效果也分别达到100%、93.3%和80.0%,离体杀灭试验显示了紫茎泽兰石油醚萃取物具有良好的杀灭牛足螨的效果。在临床试验中,两次用药治疗后,0.05和0.025 ml/ml (v/v)两个石油醚萃取物浓度试验组的12头荷斯坦奶牛感染部位足螨均被完全消除。用药2次后,直到60 d的治疗期结束,治疗组奶牛感染部位无螨虫复发现象,临床治疗效果显示,在实验中紫茎泽兰石油醚萃取物与氰戊菊酯的治疗效果相当。综合上述,体外杀螨试验与临床治疗结果均预示紫茎泽兰具有杀灭牛足螨的活性成分,可以作为植物源性中草药加以开发利用。为了追踪紫茎泽兰石油醚萃取物中具有杀虫活性的成分,利用薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)等方法对紫茎泽兰石油醚萃取物的主成分进行了初步分析,结果显示,紫茎泽兰石油醚萃取物含有5-6种主要成分。5、紫茎泽兰石油醚萃取物杀螨活性成分的分离、提取和活性研究采用多重硅胶柱层析、核磁共振等方法对紫茎泽兰石油醚萃取物的活性成分进行了提取、分离和鉴定。结果分离获得五种单一成分,并成功鉴定了其中四种,这四种单体分别为9-OXO-ageraphorone..9-OXO-10,11-dehydro-ageraphorone、豆甾醇(stigamasterol)和9β-hydroxy-ageraphorone,其中9-OXO-ageraphorone、 9-OXO-10,11-dehydro-ageraphorone和9β-hydroxy-ageraphorone对兔痒螨均具有较强的离体杀虫活性。