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共振光散射(RLS)分析技术是二十世纪90年代发展起来的,因其简单、灵敏度高而引起了人们的广泛兴趣,已经应用于核酸、蛋白质、糖类等生物大分子、金属离子、药物、表面活性剂、纳米离子和细菌等的分析。目前RLS主要是应用90°光散射信号,应用后向光散射信号较少,而应用180°后向光散射信号进行直接分析测试研究更为鲜见。本文在总结RLS技术的应用、发展及其存在问题的基础上,结合后向光散射技术的特点,建立了基于180°后向光散射信号的光谱分析技术。 本文主要研究内容如下: (1) 研究了比布列西猩红与人血清白蛋白(HSA)、牛血清白蛋白(BSA)、γ-球蛋白(γ-IgG)、溶菌酶(Lys)的共振光散射光谱特性,并同时结合流动注射(FI)分析技术建立了HSA的分析方法。结果表明,FI-RLS技术使实验测定结果的RSD值从2.43%减小到0.79%。FI-RLS技术可以用于不稳定体系分析,也可以实现自动化分析和在线分析,还可以作为高效液相色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE)的检测手段,应用于生物大分子、药物等方面的分析。利用阿魏酸还原氯金酸生成金纳米离子的聚集作用,产生显著的共振光散射增强信号,建立了测定小分子药物的共振光散射光谱分析方法。阿魏酸的检测线性范围为4.2×10-8mol/L-8.0x10-6mol/L,方法检测限为4.2×10-9mol/L。 (2) 设计和研制了180°后向光散射光纤光学探头,并结合F-2500荧光分光光度计,组装成180°后向共振光散射分析测试系统,建立了180°后向共振光散射分析方法,并从理论上论证了180°后向共振光散射分析技术的优越性。以人尿液中的氯、钾为测定对象,在