论文部分内容阅读
目的：基于TGF-p/Smad信号通路初步探究益气活血清金方抗博莱霉素致大鼠纤维化生物学作用机制。方法：采用体重200±20g的SD雄性大鼠96只随机分为空白对照组(K)、模型组(BLM)、阳性对照组(P)、益气活血清金方中药组(Y),每组24只,每笼8只。除K组外其余各组均采用一次性气管注射博来霉素(5mg/kg)法诱导肺纤维化模型,K组采用一次性气管注射生理盐水(5mg/kg)作为对照。K和BLM组每天生理盐水(10g/kgd)灌胃,P组用强的松(4.2mg/kg·d)灌胃,Y组用益气活血清金方(9.45g/kg·d)灌胃,于实验第7、14、28天分三批次处死动物,股动脉采血分离血清,用放射免疫法检测PCⅢNP、CⅣ、HA、LN;取肺组织做HE、Masson染色,免疫组化半定量法分析CⅠ、TGF-βRI、TGF-βRⅡ、Smad3、 Smad7含量,RT-PCR法分析TGF-β1mRNA、Smad3mRNA、Smad7mRNA表达量。结果：BLM组相关检测指标与K组相比均有统计学意义(P<0.05)。在促进体重增加、防止肺湿重过度增加、改善大鼠肺系数等方面Y组与BLM组相比可有显著性差异(P<0.05)。HE染色病理结果显示：在第28天时Y组与BLM组相比无明显纤维瘢痕形成。Masson染色结果显示：各时间点Y组代表胶原沉积的蓝染区明显比BLM组面积少,且颜色浅淡。放射免疫法检测PCⅢNP、CⅣ、HA、 LN的结果：中、后期Y组与BLM组相比均有统计意义(P<0.05)。免疫组化法检测CⅠ、TGF-βRI、TGF-βRⅡ、Smad3、Smad7平均积分光密度值(MIOD)结果：Y组与BLM组CⅠ、TpRⅠ、TβRⅡ、Smad3、Smad7的MIOD相比除TGF-βR Ⅰ第7、14天,Smad7第7天没有统计学差异,其它比较有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR法检测TGF-β1、Smad3、Smad7mRNA结果：Y组与BLM组除Smad3、 Smad7mRNA第7天比较无明显统计学差异,其它均有统计学差异(P<0.05)。结论：益气活血清金方抗博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用机制可能与其作用于TGF-β/Smad信号通路相关环节有关。