臭氧预防腰椎术后瘢痕粘连的动物实验

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背景与目的:腰椎手术失败综合征(FBSS)是指腰椎术后,出现腰部、臀部及下肢的顽固性、持续性疼痛及其他不适症状,或者原有症状与体征复发的一组症候群。可能与手术失误有关,也可能发生在彻底的手术之后。其中一个重要的原因是腰椎术后硬膜外瘢痕增生,发病率约在10%~40%。硬膜外瘢痕是指在硬膜外腔的手术涉及范围内形成的组织纤维化或瘢痕,是机体对损伤组织的修复反应。瘢痕的形成对纤维环、黄韧带的修复、防止椎间盘再突出、新骨的形成均具有重要意义。虽然瘢痕形成对疾病的恢复具有积极的作用,但一旦瘢痕粘连后包围并牵拉硬膜和神经根,限制其活动,引起神经纤维的轴浆运输、动脉供血、静脉回流发生变化,从而出现一系列症状,如疼痛、麻木、肌无力等。导致患者出现瘢痕粘连的原因有很多,如术中硬膜外血管出血、硬膜撕裂、硬膜外异物残留、术后伤口感染、脊柱炎、椎间盘炎等。瘢痕粘连后虽然可以通过再次手术来缓解瘢痕粘连来降低FBSS的发生,但二次手术后,瘢痕粘连再发生的概率高、程度更重,极大的降低了再次手术的成功率。因此,如何对腰椎手术的患者进行术后预防具有重要意义,从而降低FBSS的发生。  本研究主要通过对腰椎术后大鼠模型进行臭氧注入治疗,明确臭氧对术后瘢痕粘连的预防作用,为降低FBSS的发生率提供数据。  方法:选取SD大鼠60只,制作腰椎术后模型,将腰椎术后大鼠分为4组,每组15只,分别为A1组:50μg/ml臭氧组;A2组:80μg/ml臭氧组、B组:纯氧组、C组:空白组。在模型制作完成后,A1组大鼠注入50μg/ml臭氧,A2组大鼠注入80μg/ml臭氧,B组注入纯氧,C组不注入任何药物。本研究观察指标共有6个,分别为:(1)后肢运动功能评分;(2)大体观察;(3)羟脯氨酸含量测定;(4)组织学形态观察;(5)瘢痕组织内成纤维细胞计数;(6)椎管内预防粘连百分率。  结果:所有大鼠在术后均无死亡,无切口感染等情况出现,且状态良好,四组大鼠术前术后后肢运动功能评分均变化不大,差异无统计学意义(P>0.05),组间比较差异无统计学意义(P>0.05);随着术后时间的推移,四组大鼠Rydell评分均发生变化,A组大鼠瘢痕组织粘连程度随时间延长而减小,B组、C组大鼠瘢痕组织粘连程度随时间延长而增加,差异具有统计学意义(P<0.05);在四组大鼠瘢痕组织与粘连组织进行分离时,A1组大鼠出血量为(0.35±0.04)ml,A2组大鼠出血量为(0.31±0.03) ml,B组大鼠出血量为(1.04±0.26) ml,C组大鼠出血量为(1.62±0.31)ml,差异具有统计学意义(P<0.05);硬膜外瘢痕组织羟脯氨酸含量、光镜下单位面积瘢痕组织内成纤维细胞计数、椎管内预防粘连百分率经球形检验发现P=0.00,遂采用多变量方差分析,在每个时间点上进行组间的两两比较发现,2周、4周、6周时A1组与B组、A2组与B组、A1组与C组、A2组与C组、B组与C组差异均存在统计学意义(P<0.05),6周时A1组与A2组差异比较具有显著的统计学意义(P<0.05),管内预防粘连百分率在4周时A1组与A2组差异比较也具有显著的统计学意义(P<0.05)。在每个时间点上进行组内的两两比较发现,B组、C组羟脯氨酸含量在时间队列上变化不大(P>0.05),A1组、A2组在4周时羟脯氨酸含量最低(P<0.05);C组光镜下单位面积瘢痕组织内成纤维细胞计数在时间队列上变化不大(P>0.05),A1组、A2组、B组成纤维细胞计数随时间的推移出现递减趋势(P<0.05);4组成椎管内预防粘连百分率随时间的推移出现递增趋势(P<0.05)。组织染色显示A1组和A2组在硬膜外腔出现不同程度的硬膜外间隙,B组和C组硬膜外瘢痕与硬膜囊粘连仍未缓解,C组在椎板缺损相邻的非椎板切除处仍有瘢痕组织粘连。  结论:臭氧局部注射可以抑制瘢痕组织增生,对腰椎术后瘢痕粘连具有预防作用。
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