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目的: 观察温针灸干预膝骨关节炎大鼠模型血清中前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)和胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factor1,IGF-1)的表达,探讨PGE2和IGF-1在大鼠膝骨关节炎中的作用机制;观察温针灸对大鼠背根神经节(dorsal root ganglia, DRG)上河豚毒素不敏感(Tetrodotoxin-resistant,TTX-R)钠通道的电流影响,探讨温针灸治疗疼痛的可能机制,为针灸临床提供理论依据。 方法: 40只3月龄雄性SD(Sprague-Dawley, SD)大鼠随机分为正常组、模型组、温针灸组、药物组。正常组除外,其他3组均采用日本鬼头康彦关节腔内注射木瓜蛋白酶的方法同时联合强迫运动造模。温针灸组取大鼠膝前穴(双)进行治疗,药物组用美洛昔康溶液灌胃。治疗结束后,micro-CT扫描双膝关节,然后处死大鼠取材,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清中PGE2及IGF-1表达情况;采用电生理细胞膜片钳检测大鼠DRG上TTX-R钠通道电流情况。 结果: 第一部分: 1)大鼠体重变化:治疗前正常组、模型组、温针灸组和药物组大鼠体重无显著差异(P>0.05);治疗20天后,药物组和温针灸组大鼠体重较模型组显著增加(P<0.01),温针灸组大鼠体重与药物组大鼠体重差异不明显(P<0.05)。 2)大鼠外周血清PGE2含量:ELISA检测结果显示各组大鼠外周血清PGE2浓度有显著差异性(P<0.01),结果显示,与模型组比较,其他三组PGE2浓度均显著性降低(P<0.01),温针灸组和药物组相比差异无显著性(P>0.05),温针灸组和药物组二者与正常组相比存在差异性(P<0.01)。提示温针灸和药物在一定程度上降低了KOA大鼠外周血清PGE2浓度。 3)大鼠外周血清IGF-1含量:ELISA检测结果显示各组大鼠外周血清IGF-1浓度有显著差异性(P<0.01),多样本均数间两两比较采用LSD法,结果显示,与正常组比较,其他三组IGF-1浓度显著升高(P<0.01),温针灸组、药物组与模型组相比具有显著性差异(P<0.01),温针灸组与模型组相比具有显著差异(P<0.01)。提示温针灸可有效提高KOA大鼠外周血清IGF-1浓度,且效果优于药物组。 第二部分: 大鼠TTX-R钠电流变化结果显示各组大鼠TTX-R钠电流差异具有统计学意义(P<0.01)。与正常组相比,模型组TTX-R钠电流密度显著升高(P<0.01);与模型组相比,温针灸组和药物组电流密度显著降低(P<0.01);温针灸组和药物组相比电流密度差异无统计学意义(P>0.05),提示温针灸和药物均可以在一定程度上通过降低TTX-R钠电流密度,从而起到镇痛作用,且二者无显著差异。 第三部分: 1)大鼠双膝关节micro-CT2D重建观察:正常组大鼠髁间嵴光滑,髌股关节间隙适中,髌骨侧缘圆滑无增生。模型组大鼠髁间嵴变尖,髌股关节间隙变窄,髌骨后缘骨密度增高,髌骨侧缘增生变尖。药物组髁间嵴稍尖,髌股关节间隙变窄,髌骨后缘骨密度增高。温针灸组大鼠髁间嵴圆滑,髌股关节间隙正常,髌骨侧缘平滑无增生。提示温针灸作用要优于药物作用。 2)大鼠双膝关节micro-CT3D重建观察:正常组大鼠膝关节光滑完整未见骨质破坏,模型组大鼠膝关节股骨髁及胫骨平台均可见广泛骨质破坏,温针灸组关节骨质基本正常,而药物组大鼠还可见轻微骨质破坏。提示温针灸对膝关节骨质的保护作用要优于药物。 结论: 1)温针灸可以有效促进膝关节损伤的修复。 2)温针灸可以下调KOA模型大鼠外周血清PGE2表达,上调IGF-1的表达。 3)温针灸可降低DRG神经元细胞膜TTX-R电流密度,改善炎性疼痛痛敏状态。温针灸通过提高IGF-1的表达,起到促进关节损伤修复的作用。通过下调PGE2的表达,减小炎性痛信号的传导,抑制中枢痛敏化的形成,这可能是温针灸治疗膝骨关节炎炎性疼痛的机制之一。