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目的以杜仲叶为研究对象,系统地考察杜仲叶中的化学成分;对不同地区及不同采收时间的杜仲叶中多个化学成分进行了含量测定,考察杜仲叶中多个化学成分的季节性及地域性差异;建立杜仲叶的多波长液相指纹图谱,结合化学计量学对不同产地杜仲叶的分类进行考察,为杜仲叶的全面质量控制提供理论依据。方法与结果1通过对杜仲叶水提物的分离纯化,获得9个化合物,并结合现代光谱分析技术,分别鉴定为:京尼平苷酸、绿原酸甲酯、绿原酸、咖啡酸、槲皮素-3-O-木糖基葡萄糖苷、芦丁、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素,其中绿原酸甲酯是首次从杜仲叶中分离得到。2以绿原酸为对照品,建立与京尼平苷酸、咖啡酸、芦丁、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷的相对校正因子,利用相对校正因子计算其他4个成分的含量;同时与外标法测定的结果进行比较;结果显示两种方法无显著性差异(P>0.05),表明“一测多评法”可信、准确,适用于当京尼平苷酸、咖啡酸、芦丁、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷对照品缺少时的含量测定。3对不同产地及不同采收月份杜仲叶中的绿原酸、京尼平苷酸、芦丁、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷进行了含量测定;考察了杜仲叶中绿原酸、京尼平苷酸、芦丁、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷的季节性及地域性差异。研究结果表明绿原酸及京尼平苷酸呈现先上升后下降再趋于平稳的趋势;而芦丁及槲皮素-3-0-β-D-葡萄糖苷呈现逐步下降后有一个回升的趋势;杜仲叶中四个化学成分的地域性差别较大,有些差异达三、四十倍;综合含量测定结果,初步得出湖南张家界杜仲叶适宜采收期为5月,而云南昆明及贵州贵阳较适宜采收期为6月。4采用HPLC-DAD获得杜仲叶样品在230mm、239nm、258nm、327nm下的指纹图谱数据,结合化学计量学对不同产地杜仲叶进行分析。结果表明:主成分分析(PCA)投影图上27批杜仲叶按照产地分别聚集在A(湖南张家界201104-10月、贵州贵阳201106、河北唐山201108)、B(贵州贵阳201108-10月、河北恩施201107、广西河池201109、湖南常德201109、湖南邵阳201]09)、C(云南昆明201106、云南昆明201108—10月、湖南慈利201201、云南玉溪201110、湖南常德201201)三个区,系统聚类分析(HCA)在欧氏距离为2.27时将27批样品分为四类,10号样品单独一类,其余分类与PCA投影图一致。并采用载荷矢量(loadings)筛选出京尼平苷酸、绿原酸、绿原酸甲酯为重要差异性特征化合物。结论杜仲叶作为一种具有多种药理活性且资源丰富的药材,蕴藏着巨大的开发潜力。但是杜仲叶质量很不稳定,与产地及采收季节有关,本课题对杜仲叶成分及指纹图谱的研究为建立杜仲叶药材的质量标准提供了实验依据,对有效开发和充分利用杜仲叶药材具有重要的参考价值。