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阿尔茨海默病(AD)又名老年性痴呆,是一种以进行性认知损害和个性改变为特征的神经退行性疾病。其病发群体主要是老年人。随着社会老龄化的加剧,阿尔兹海默病逐渐成为威胁人类健康的主要疾病之一[1]。然而,由于现有主流治疗药物治疗效果不理想,且具有肝毒性等副作用,寻找更安全、有效的药物成为AD治疗的迫切需求。中药由于其多靶点、副作用小等特性受到越来越多的关注。从中医角度,AD为本虚标实的疾病,而多见肾虚髓亏为本、痰蒙脑窍为标。补肾、化痰是中医治疗AD的重要治法。好忘方出自于《备急千金要方》,是唐代著名医家孙思邈补肾、化痰并用,用于治疗健忘的经典方剂,但关于其应用于AD的治疗研究还相对缺乏。目的:探究好忘方对AD模型动物认知障碍的改善作用及其潜在的分子生物学机制。方法:1.使用东莨宕碱诱导ICR小鼠认知损害,在AD急性模型上初步评估好忘方对AD模型小鼠认知障碍的改善作用。2.使用SAMP8小鼠探究好忘方对AD自发模型动物的认知改善效果、特点,并从PKA-GSK3 β-TAU和PKA-CREB通路探讨好忘方改善AD模型小鼠的分子生物学机制。3.使用ICR小鼠探究PKA对好忘方治疗AD模型小鼠认知障碍及提高正常小鼠认知能力的重要性。结果:1.东莨宕碱模型下,与空白对照组相比,模型对照组Morris水迷宫逃避潜伏期显著增长,穿越次数明显下降,呈现出明显认知障碍。好忘方和多奈哌齐给药一周治疗均可显著提升造模小鼠Morris水迷宫站台穿越次数。2.SAMP8模型下,与空白对照组相比,SAMP8小鼠在Morris水迷宫逃避潜伏期、站台穿越次数、目标象限路程比和新物体识别中均呈现认知损害表型。给药2周,好忘方在提高Morris水迷宫站台穿越次数、目标象限路程比上已显示出治疗效果,且显著上调了 SAMP8小鼠海马区PKA蛋白表达。多奈哌齐此时尚未起效;给药3周,好忘方和多奈哌齐皆可缩短SAMP8小鼠Morris水迷宫潜伏期,提高站台穿越次数及新物体识别指数。此外,好忘方可提高SAMP8小鼠Morris水迷宫目标象限路程比,并在缩短逃避潜伏期方面优于多奈哌齐。Western Blot结果显示,好忘方和多奈哌齐皆可显著逆转SAMP8小鼠海马区PKA-GSK3 β-TAU通路蛋白水平,上调PKA-CREB及其下游BDNF、SYNAPSIN1、GluR1、PSD95蛋白表达;给药3周,停药1周后,Morris水迷宫和新物体识别测试中,好忘方给药3周的治疗效果并未减退,而多奈哌齐只在缩短小鼠Morris水迷宫潜伏期方面依然有效。此外,好忘方仍可上调SAMP8小鼠海马区PKA蛋白水平,多奈哌齐对PKA的调节作用已失效,且好忘方组PKA蛋白水平明显高于多奈哌齐组。3.(1)东莨宕碱模型下,PKA阻断剂H89显著逆转了好忘方对造模小鼠站台穿越次数的提升作用,阻断了好忘方对磷酸化TAU的下调作用。(2)未造模条件下,好忘方给药显著提高了正常小鼠水迷宫站台穿越次数及Y迷宫新奇臂时间比,上调了小鼠海马区PKA、CREB、PSD95的蛋白表达。给与H89阻断PKA后,上述改善效果均消失或被显著逆转。结论:1.好忘方可改善AD东莨宕碱模型及SAMP8模型小鼠认知障碍。2.好忘方的认知改善作用与PKA-GSK3 β-TAU介导的磷酸化TAU的清除及PKA-CREB介导的突触可塑性的增强作用密切相关。3.好忘方对AD模型小鼠认知障碍的改善作用及对正常小鼠认知功能的增强作用均依赖于PKA的激活。