B7-H3对小鼠前列腺癌皮下移植瘤的影响

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目的探讨B7-H3对BALB/C-nu小鼠和C57BL/6小鼠前列腺癌移植瘤的影响及其可能的机制。方法研究分两部分进行:第一部分:利用基因芯片技术检测绿色荧光蛋白(GFP)基因稳定转染的小鼠前列腺癌RM-1细胞株(RM-1/GFP)、B7-H3和GFP基因均稳定转染的RM-1细胞株(RM-1/B7-H3)的基因表达谱,通过芯片数据分析筛选出上述两种细胞株之间的差异表达基因,进一步挖掘其生物学信息,寻找B7-H3对小鼠前列腺癌皮下移植瘤影响的可能机制。第二部分:将RM-1/B7-H3细胞悬液接种到BALB/C-nu小鼠(A组)和C57BL/6(B组)小鼠左侧腹股沟皮下,RM-1/GFP细胞悬液接种到BALB/C-nu小鼠(A组)和C57BL/6(B组)小鼠右侧腹股沟皮下,建立BALB/C-nu小鼠和C57BL/6小鼠前列腺癌皮下移植瘤模型。观察并记录肿瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线;进一步用RT-PCR验证差异表达基因Bcl-2在C57BL/6小鼠肿瘤组织中mRNA的表达水平。结果第一部分:RM-1/B7-H3细胞株和RM-1/GFP细胞株之间的基因表达谱差异明显;与RM-1/GFP细胞相比,RM-1/B7-H3细胞中表达上调1.5倍及1.5倍以上的有309个基因;表达下调1.5倍及1.5倍以上的有127个基因。涉及凋亡,免疫应答,程序性细胞死亡的调节,细胞粘附、侵袭、转移和细胞周期等多种生物学过程,以及钙离子信号通路、G蛋白偶联受体介导的信号通路等多种信号通路。第二部分:在第15天和第17天,A组左侧移植瘤生长速度快于右侧移植瘤,差异有统计学意义P<0.05);在第9天、第11天、第13天、第15天和第17天,B组左侧移植瘤生长速度快于右侧移植瘤,差异有统计学意义(P<0.05);第一部分基因芯片结果显示与抑制细胞凋亡相关的表达上调2倍以上的基因有6个,选取其中的Bcl-2基因行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,RT-PCR结果显示RM-1/B7-H3肿瘤组织中Bcl-2的mRNA相对表达量明显高于RM-1/GFP肿瘤组织,差异具有统计学意义(P<0.05),与基因芯片结果一致。结论无论T细胞存在与否,B7-H3均能促进小鼠前列腺癌RM-1细胞皮下移植瘤的生长,其机制可能与Bcl-2基因上调从而抑制RM-1/B7-H3细胞凋亡密切相关。
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