吡唑醚菌酯影响伏马毒素产毒机理的初步研究

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玉米穗腐病是玉米生产过程中的重要病害,能造成严重的产量损失。拟轮枝镰孢是玉米穗腐病的主要致病菌之一,其产生的伏马毒素,不仅污染玉米及其制品,而且危害人畜健康。本文研究了不同浓度吡唑醚菌酯对拟轮枝镰孢野生型菌株、FUM1过表达菌株、FUM21过表达菌株、FUM21不同沉默效率菌株的生长速率、伏马毒素产毒能力及菌株中FUM家族基因簇表达量的影响;不同氮源、碳源对拟轮枝镰孢FUM21过表达菌株伏马毒素产毒能力的影响,初步明确了吡唑醚菌酯抑制拟轮枝镰孢产生伏马毒素的机理,为玉米穗腐病的防控及抑制伏马毒素的产生提供了参考。主要研究结果如下:1.吡唑醚菌酯抑制拟轮枝镰孢产生伏马毒素。当吡唑醚菌酯浓度为0.01μg/mL、0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL时,对伏马毒素产生的抑制率分别为30.67%、31.25%、44.89%、32.29%、22.57%,吡唑醚菌酯的浓度为到0.1μg/mL时,对拟轮枝镰孢产生伏马毒素的抑制作用最强。2.吡唑醚菌酯处理拟轮枝镰孢后,抑制了FUM1、FUM2、FUM6、FUM7、FUM8、FUM19、FUM21基因的表达量。吡唑醚菌酯对拟轮枝镰孢FUM1、FUM2、FUM6、FUM7、FUM8、FUM19、FUM21基因表达量的抑制率分别为73%、27.73%、40.21%、38.46%、36.51%、47.36%、66.94%,吡唑醚菌酯主要影响拟轮枝镰孢FUM1和FUM21基因的表达。3.吡唑醚菌酯抑制拟轮枝镰孢野生型及FUM1过表达菌株、FUM21过表达菌株的生长、产孢及伏马毒素产毒能力。吡唑醚菌酯处理后,FUM1、FUM21过表达菌株的生长速率为1.03±0.01 cm/d和0.97±0.02 cm/d;吡唑醚菌酯处理FUM1、FUM21过表达菌株的产孢量分别为20.21±0.35个和15.77±0.14个,野生型菌株的产孢量为13.45±0.26个,显著低于过表达菌株;吡唑醚菌酯对于拟轮枝镰孢FUM1、FUM21过表达菌株伏马毒素产毒能力的抑制率分别为43.84%和36.63%。4.吡唑醚菌酯抑制拟轮枝镰孢FUM21沉默菌株的生长速率及产孢量,0.1μg/mL吡唑醚菌酯处理FUM21沉默效率分别为19.32%、28.95%、42.98%、60.87%、78.14%的菌株,生长速率分别为1.14±0.01 cm/d、0.93±0.06 cm/d、0.88±0.03 cm/d、0.79±0.05cm/d、0.67±0.06 cm/d,差异不显著;吡唑醚菌酯处理FUM21不同沉默效率菌株,对沉默效率高的菌株产孢抑制作用强,产孢量分别为19.33±0.04个、15.67±0.08个、11.25±0.04个、9.37±0.11个、8.13±0.02个,FUM21沉默效率高于42.98%时,产孢能力显著下降。通过HPLC-柱后衍生法检测不同沉默效率菌株伏马毒素合成情况,FUM21沉默效率为78.14%,产生伏马毒素189.93μg/g,显著低于野生型。5.不同氮源和碳源影响FUM21过表达菌株产生伏马毒素。氮源为牛肉膏和碳源为甘露醇时,促进FUM21过表达菌株产生伏马毒素。以牛肉膏为氮源时,FUM21过表达菌株产生伏马毒素的量为31.97±0.06μg/g,显著高于蛋白胨、硫酸铵、谷氨酸、硝酸钾作为氮源时伏马毒素的产生量。甘露醇作为碳源时,促进FUM21过表达菌株产生伏马毒素的量为28.97±0.13μg/g,显著高于可溶性淀粉、麦芽糖、果糖、葡萄糖作为碳源伏马毒素的产生量。
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