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目的:探索辐射介导下HeLa细胞内IER5的生物学功能及IER5与Cdc25B表达的关系。方法:采用4 Gy γ射线分别照射HeLa细胞和siIER5-HeLa细胞,收集照射后0、0.5、2、4、8、12、16、24、36、48h的细胞样本,并设未照射细胞为对照组。采用Western blot检测细胞内IER5和Cdc25B蛋白的表达;流式细胞术检测照射后G2期周期阻滞情况。另外对HeLa细胞分别转染siNC和siIER5,对siIER5-HeLa细胞分别转染IER5过表达质粒与空载体质粒,然后采用2Gy和4Gy γ射线照射各组细胞,收集照射后0.5、2、4、8、12、24h和对照组细胞样,通过流式细胞术,qPCR和Western blot检测细胞内G2/M期阻滞及IER5与Cdc25B mRNA和蛋白水平变化。通过生物信息学分析及查阅相关文献筛选出可能参与IER5调控Cdc25B基因转录的调控因子,通过干扰HeLa细胞内IER5的表达后,检测各转录调控蛋白水平变化,来初步探索在辐射介导下IER5影响Cdc25B转录可能的机制。结果:1.在4Gy剂量辐射介导下HeLa细胞组与siIER5-HeLa细胞组中IER5蛋白表达量分别从8h与0h开始上调(*P<0.05),对应时间点Cdc25B表达量下调(*P<0.05),蛋白表达相关系数分别为-0.686与-0.633。并且在8h两组细胞都出现了明显的G2/M期阻滞。2.在2Gy、4Gy剂量辐射介导下转染siIER5的HeLa细胞较转染siNC的HeLa细胞G2/M期阻滞比例有所降低。同时转染siIER5导致HeLa细胞内IER5表达量上调时间延迟的同时也会引起Cdc25B蛋白和mRNA水平上调时间点和表达量的改变。当IER5上调时(*P<0.05),Cdc25B蛋白和mRNA表达量会下调(*P<0.05)。3.在2Gy、4Gy剂量辐射介导下转染IER5过表达质粒的siIER5-HeLa细胞组较转染空载体质粒的siIER5-HeLa细胞组G2/M期阻滞比例显著上升,并且阻滞持续时间更长。同时转染IER5过表达质粒导致IER5表达量上调的同时也会引起Cdc25B蛋白和mRNA水平的下调(*P<0.05)。4.生物信息学分析及查阅相关文献筛选得到p300、p53、NF-YB可能是2Gy、4Gy辐射介导下参与IER5调控Cdc25B转录的的重要调控蛋白,不同辐射剂量介导下通过检测干扰IER5表达前后HeLa细胞内p300、p53、NF-YB蛋白水平变化发现p300蛋白受IER5影响较大,干扰IER5表达后p300蛋白水平会下调(*P<0.05),而p53表达量受辐射剂量影响较大,受IER5影响较小。而NF-YB蛋白水平则不受IER5表达量变化影响,只受辐射剂量影响。结论:1.辐射介导下HeLa细胞内IER5与Cdc25B蛋白在表达上存在负相关关系,IER5表达量变化时会影响细胞周期分布,IER5表达量增加时G2/M期阻滞比例增加。2.HeLa细胞转染siIER5导致IER5表达量下调可以缓解2Gy、4Gy辐射剂量下造成的G2/M期阻滞状况,并且IER5是Cdc25B上游调控蛋白。3.siIER5-HeLa细胞转染IER5过表达质粒导致IER5表达量上调可以导致2Gy、4Gy辐射剂量下造成的G2/M阻滞比例上调和阻滞时间延长,并且IER5是从转录水平负调控Cdc25B的表达。4.辐射介导下HeLa细胞内存在IER5通过调控p300蛋白水平影响Cdc25B的转录的可能,p53蛋白水平受IER5与辐射条件共同影响,IER5与Cdc25B的转录调控蛋白NF-YB不存在调控关系。