论文部分内容阅读
目的：哺乳动物胚胎着床是侵入态胚泡的形成、接受态子宫内膜的建立、胚泡与子宫内膜上皮细胞相互识别、定位及黏附进而穿透子宫内膜表面、植入内膜基质和胎盘的复杂过程。一些细胞因子的表达高峰和“着床窗口期”相吻合,它们通过自分泌或旁分泌方式参与胚胎生长发育及着床过程的调节。如高浓度的白血病抑制因子(LIF)促进滋养层细胞增殖和内细胞团生长,并有助于移植后胚胎着床和存活；中和胚泡表面LIF可以阻断母胎之间的识别和黏附而致着床失败。因此认为细胞因子在母胎识别中起中介作用。生长因子在着床期子宫内膜表面及胚胎高表达,参与生殖调节,在排卵、胚胎发育、胚泡着床、胚胎干细胞的分化方面起着重要作用。胚泡滋养层细胞与子宫内膜的相互识别、黏附进而侵入是着床过程中细胞与细胞,细胞与胞外基质相互作用的结果,这种作用离不开生长因子的介导。胚胎着床过程中甾体激素的调控起着关键的作用,本研究探讨子宫内膜生长因子的表达与卵巢激素的相关性,分析雌、孕激素是否通过诱导妊娠阶段母胎双方生长因子的表达来调节着床。方法：本研究以增生期、分泌期月经周期规律的子宫肌瘤术后人子宫内膜以及小鼠为样品,应用免疫组化、RT-PCR等方法,研究不同激素状态下子宫内膜生长因子的表达。通过早孕及去卵巢小鼠模型：1)制备围着床期(早孕)小鼠子宫内膜：成年雌性超排卵小白鼠与成年雄鼠1：1合笼交配,次日阴道检查有阴栓者确定为妊娠第一天；2)制备去卵巢后激素处理小鼠：成年雌鼠切除卵巢待内源性激素消退后分成4组(对照组,雌激素组,孕激素组,雌、孕激素联合组)。采用RT-PCR方法进一步从基因水平分析甾体类激素对卵巢切除后激素替代模型的小鼠子宫内膜中生长因子表达水平变化的影响。结果：免疫组化结果显示,生长因子EGF.EGFR.IGF.TGF.VEGF等在人子宫内膜均有阳性表达,而在子宫内膜上皮细胞的表达,多以分泌期强于增生期,因此推测其表达受激素调控;RT-PCR检测小鼠子宫内膜生长因子的表达发现,在怀孕小鼠早期(孕D1)子宫内膜生长因子表达水平较低,在孕D3-D5维持在高水平表达,并在着床期小鼠子宫内膜(孕D4)呈现表达高峰；而对卵巢切除后甾体类激素替代模型的小鼠子宫内膜生长因子基因表达分析显示,生长因子的表达受雌、孕激素的调控、并且作用基本相似,即多受雌激素下调和孕激素的上调,两种激素的作用相互拮抗影响生长因子的表达。结论：生长因子在子宫内膜表达,卵巢激素可在转录水平上调控生长因子的表达。