腐浆细菌的鉴定及酶法控制腐浆生物膜的研究

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本论文在介绍了近年来国内外处理腐浆微生物现状的基础上,对腐浆细菌进行分离和鉴定,对腐浆生物膜回接试验方法进行了研究以及对溶菌酶处理腐浆细菌方法进行探讨,主要内容与所得结论如下:(1)以UPM(芬欧汇川纸业有限公司)常熟分公司PM2纸机机架腐浆样品为菌源,在基础培养基中经过富集培养、分离和筛选得到10株细菌菌株,通过对其形态特征、生理生化特性、以及16S rRNA序列分析,初步鉴定为N1、N3为鞘氨醇单胞菌Sphingomonasazotifigens、N2鉴定为腐败假单胞菌Pseudomonas putrefaciens,N4为未培养细菌Unculturedbacterium、N5为Filimonas lacunae、N6为Asticcacaulis excentricus、N7为少动假单胞菌Pseudomonas.paucimobilis、N8为Siphonobacter aquaeclarae、N9为不解糖鞘氨醇单胞菌Sphingomonas pruni、N10为Flectobacillus Larkin。(2)将分离后的10株细菌分别回接到含细小纤维的回接试样中,检测腐浆细菌的生物膜对细小纤维的絮聚情况,结果显示N5、N8、N10对细小纤维有很大的絮凝沉淀作用,由此推断这3株细菌的生物膜活性强,是腐浆中的有害细菌。(3)选取生物膜活性较强的细菌N8(Siphonobacter aquaeclarae)进行回接实验,得到最优化条件:发酵时间为24h,CaCl2加入量2ml,菌液添加量2ml,搅拌时间4min,沉降时间为30min。(4)用溶菌酶处理生物膜活性较强的细菌N5、N8、N10。结果发现,将溶菌酶添加到白水溶液中有较好的抑制细菌生物膜生长的效果,其絮凝率可由54.2%、53.0%、57.8%下降到35.1%、32.9%、24.9%。通过优化实验,筛选出溶菌酶处理腐浆细菌生物膜的最佳用量为200ppm,最适温度为40℃,最佳pH7.0,最佳处理时间为50min。(5)溶菌酶配合异噻唑啉酮处理腐浆生物膜产生菌,配合使用后N5、N8、N10絮凝率可分别下降到18.6%,14.2%,14.8%,故溶菌酶配合杀菌剂使用具有良好的控制生物膜生长的效果。
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