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目的:探讨千金藤碱对鼻咽癌CNE-1细胞和CNE-2细胞的放疗增敏作用及其作用机制,为千金藤碱能够作为鼻咽癌临床放疗的增敏剂提供科学理论依据。方法:以人鼻咽癌CNE-1细胞和CNE-2细胞为研究对象。(1)不同浓度千金藤碱作用于CNE-1细胞和CNE-2细胞,采用CCK-8法检测千金藤碱对这2种细胞的药物毒性;(2)克隆形成实验观察千金藤碱对鼻咽癌CNE-1细胞和CNE-2细胞的放疗增敏作用,计算各组存活分数和放射增敏(SER),比较放射线单独作用与放射线和千金藤碱联合作用后细胞的增殖能力。(3)采用细胞流式仪检测千金藤碱和放射线单独作用及两者联合作用后对鼻咽癌CNE-1细胞和CNE-2细胞的周期及凋亡的影响;(4)Western-blot法检测千金藤碱和放射线单独作用以及放射线与千金藤碱联合应用后鼻咽癌CNE-1细胞和CNE-2细胞中DNA相关修复蛋白RAD51和XRCC1的表达情况。结果:(1)CCK-8结果显示千金藤碱对鼻咽癌CNE-1细胞和CNE-2细胞株生长均有抑制作用,并呈时间和剂量依赖性;(2)克隆形成实验显示,CNE-1细胞和CNE-2细胞的SER(放疗增敏比)分别为1.26和1.23。CNE-1细胞和CNE-2细胞的单纯照射组(D0)、(Dq)、SF2均较联合处理组降低,分别为:CNE-1细胞单纯照射组与联合处理组平均致死剂(D0)(2.7:2.22)、准域剂量(Dq)(1.8:1.3)、2Gy照射的存活分数(SF2)(0.71:0.63);而CNE-2细胞单纯照射组与联合处理组平均致死剂(D0)(3.34::3.15)、准域剂量(Dq)(2.96:1.94)、2Gy照射的存活分数(SF2)(0.84:0.74)。千金藤碱明显增强了CNE-1细胞和CNE-2细胞的的放疗敏感性;(3)流式细胞仪检测细胞周期结果提示:联合处理组与空白对照组、千金藤碱组、单纯照射组比较,细胞周期显著阻滞于放射相对较敏感时相的G2/M期(CNE-1周期阻滞比:36.29±6.24比9.64±4.98、14.35±2.8、19.19±1.93;CNE-2周期阻滞比:36.43±12.59比8.21±3.3、10.74±5.16、21.78±3.23。组间比较差异有统计学意义P<0.05);(4)流式细胞仪检测细胞凋亡率变化结果显示,单细胞按不同处理组处理48h后检测细胞凋亡变化。与空白对照组、单纯照射组相比,联合处理组无论是CNE-1细胞还是CNE-2细胞,其凋亡细胞比例都明显增加(CNE-1细胞凋亡率比:15.57±2.59比4.4±1.81、10.97±0.45;CNE-2细胞凋亡率比:13.23±2.7比1.55±0.83、9.07±2.2,均P<0.05);(5)应用western blotting测定发现,千金藤碱联合放射线中RAD51和XRCC1的表达均低于单纯药物组和单纯照射组(CNE-1细胞RAD51灰度值比较:1.08±0.01比1.3±0.07、1.42±0.03;XRCC1灰度值比较:0.50±0.07比0.59±0.04、0.88±0.09。CNE-2细胞RAD51灰度值比较:0.54±0.05比0.66±0.05、0.80±0.09;XRCC1灰度值比较:0.52±0.01比0.84±0.02、0.96±0.03。组间比较均P<0.05)。结论:千金藤碱能增加鼻咽癌CNE-1细胞和CNE-2细胞的放射敏感性,其机制可能与阻滞鼻咽癌细胞周期在G2/M期、诱导鼻咽癌细胞的凋亡、抑制鼻咽癌细胞损的伤修复相关。