硝酸益康唑体外诱导MCF-7细胞凋亡的初步机制研究

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硝酸益康唑(Econazole Nitrate,EN)是一种抗真菌制剂,用于治疗真菌病,同时,EN也显示出抗肿瘤的作用,但其潜在的作用机制仍不明了。在这个研究中,我们采用MTT法、克隆集落形成法、荧光染色法、琼脂糖凝胶电泳法、流式细胞术和Western Blotting等研究方法,考察EN体外诱导MCF-7细胞凋亡的作用,并对其诱导凋亡机制进行初步探讨。MTT法和克隆集落形成分析结果表明,EN以时间和剂量依赖方式抑制MCF-7细胞增殖;荧光染色和琼脂糖凝聚电泳检测发现EN处理细胞出现凋亡小体和DNA片段化等典型的凋亡特征,证明EN可诱导MCF-7细胞发生凋亡。同时,流式细胞仪检测显示EN可导致线粒体膜电位降低;蛋白印迹分析可降低procaspase-3、procaspase-9和Bcl-2蛋白表达,提示MCF-7细胞发生凋亡过程中线粒体途径和caspases途径的凋亡途径发生活化;但N-乙酰半胱氨酸、谷胱甘肽、硫辛酸、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶对EN诱导的MCF-7细胞凋亡没有明显的抑制作用,提示EN作用可能与活性氧无关。总之,这些结果都表明,EN可体外诱导MCF-7发生细胞凋亡,其机制可能涉及线粒体途径和caspases途径。
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