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饲料在运输、储存过程中容易携带大肠杆菌、沙门氏菌,单增李斯特菌等病原微生物,这些病原微生物随着饲料进入动物体内,会引起动物肠道传染病,对动物的健康构成严重威胁。解决这一问题目前使用最广泛的仍然是抗生素。然而随着抗生素的应用,细菌耐药性日益普遍,同时,抗生素的药物残留问题也逐渐引起了人们的注意。世界许多畜牧发达国家和地区限制抗生素的使用,研究和开发绿色饲料添加剂产品,已经成为世界性的研究课题。筛选获得具有抑菌功能的,耐酸耐胆盐和耐饲料加工的饲用乳酸菌,并确定它的抑菌功能物质对开发绿色饲料添加剂具有重要的实用价值。从饲料原料中分离得到能够抑制大肠杆菌生长的乳酸菌,排除发酵液中有机酸和H2O2的干扰,初步确定4株具有较强抑菌活性的饲用乳酸菌。进一步通过耐酸、耐胆盐和耐热实验将乳酸菌R16确定为目标菌,经形态学、API和16S rDNA基因序列分析鉴定该菌株为乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici),并将其命名为乳酸片球菌R16(Pediococcus acidilactici R16)。通过超滤、阴离子交换色谱、凝胶过滤色谱和反相高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid,RP-HPLC)从乳酸片球菌R16发酵液中分离抑制大肠杆菌的活性物质,获得一种对大肠杆菌具有抑制作用的乳酸菌素,通过液相色谱-质谱联用技术(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)初步鉴定该乳酸菌素的分子量大小为705.63Da,等电点为3.58,氨基酸序列为ENGEEE。通过化学合成的方法,确认该乳酸菌素对大肠杆菌具有抑制作用,将其命名为乳酸菌素R16。对乳酸菌素R16进行生物学特性研究,发现其在pH 3.05.0时,抑菌效果最好,在pH 6.08.0时,抑菌活性逐渐降低。在≤80℃中处理30 min,乳酸菌素R16的抑菌活性几乎不变,在90、100、121℃处理30、30、15 min,其抑菌活性分别损失了21.95%、49.47%和59.98%。乳酸菌素R16对蛋白酶敏感性低,经蛋白酶处理后,其抑菌活性无明显变化。对抑菌谱的测定实验表明,乳酸菌素R16对革兰氏阳性菌具有较强的抑制作用,对革兰氏阴性菌抑制效果不明显,且对大肠杆菌和单增李斯特菌的最小抑菌浓度为6.40 mg?mL-1,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为3.40 mg?mL-1。乳酸片球菌R16和乳酸菌素R16能够有效抑制豆粕中大肠杆菌的增长,且能够杀死17.20%和33.44%豆粕中的大肠杆菌。乳酸菌素R16对于酿酒酵母和植物乳杆菌具有一定的增殖作用。乳酸菌素R16对过氧化氢、羟自由基、DPPH?自由基和超氧阴离子具有一定的清除能力,清除率分别为25.65%、70.13%、79.42%和10.11%。