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目的研究促红细胞生长素(Erythropoietin, EPO)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后(hypoxic ischemic brain damage, HIBD)海马齿状回(DG)5-溴脱氧尿嘧啶(5-bromo-2-deoxyuridine, BrdU)和CA1区胶原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)表达变化的影响,从神经细胞再生分化和行为学两方面探索不同剂量EPO对新生鼠HIBD的保护作用,为临床应用EPO治疗新生儿缺氧缺血性脑病选择合适的治疗剂量提供实验依据。方法新生7日龄Wistar大鼠160只随机分为假手术组、HIBD生理盐水对照组、EPO治疗Ⅰ组、EPO治疗Ⅱ组组、EPO治疗Ⅲ组,每组32只,通过结扎并剪断7日龄新生大鼠右侧颈总动脉,吸入8%O2+92%N2的低氧气源2小时制备新生鼠HIBD模型。EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别于缺氧缺血完成后即刻注射rhEPP5u/g、10u/g、15u/g, HIBD对照组即刻注射生理盐水0.5ml/只,连续14天,除用于Morris水迷宫(Morris water maze)行为测定的大鼠外,所有动物分别于处死前1天注射BrdU。各组分别于术后14天、21天、28天不同时点断头取脑组织。用免疫组织化学染色法和计算机图像分析技术检测各组大鼠不同时点海马DG区BrdU和CA1区GFAP表达变化及HE染色观察脑组织病理变化,通过Morris水迷宫实验观察五组大鼠的学习记忆功能。结果(1)海马DG区BrdU表达：BrdU阳性细胞数随着新生鼠的脑发育成熟而减少,同组大鼠BrdU表达每后一时点低于前一时点,差异均有统计学意义(P<0.05)；五组大鼠同一时点BrdU表达差异有统计学意义(P<0.05),其中EPO干预组表达最多,HIBD对照组表达次之,假手术组表达最少(术后14天、21天有差异,术后28天则无差异)；EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组各个时点海马DG区BrdU表达随着剂量增加呈现逐渐减少趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。(2)海马CA1区GFAP的表达：同组大鼠CA1区GFAP的表达随着时相的延长而减少,差异有统计学意义(P<0.05)；各组大鼠同一时相GFAP表达比较,差异有统计学意义(P<0.05),EPO干预组表达最多,HIBD对照组表达次之,假手术组表达最少(术后14天、21天有差异,术后28天则无差异)；EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组海马DG区BrdU表达差异无统计学意义(P>0.05)。(3)Morris水迷宫实验①定位航行结果显示,五组大鼠逃逸伏期总体比较差异有统计学意义(P<0.05),其中假手术组最短,EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组次之,HIBD对照组最长；同一组大鼠逃逸潜伏期随着时间的推移都有缩小的趋势。②空间搜索实验示,HIBD对照组平台周边区域NE象限搜索时间与假手术组、EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组间差异均有统计学意义(P<0.05),而假手术组与EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组间比较,差异无统计学意义(P>0.05),EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组间相互比较,差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论1、外源性给予EPO治疗新生鼠HIBD后可促进中枢神经系统中BrdU、GFAP的表达,促进受损神经细胞增殖、再生,在缺氧缺血性脑损伤中发挥一定的保护作用；2、EPO可改善新生鼠缺氧缺血性脑损伤后的学习和记忆功能；3、缺氧缺血性脑损伤可刺激新生鼠脑内的神经干细胞增殖、分化和再生；4、通过对本试验的选择的三种EPO实验剂量对新生大鼠HIBD的影响结果表明,随着EPO剂量的增加,反映新生大鼠HIBD后神经细胞再生的指标表达呈现下降趋势,增加EPO剂量并不能增强脑保护作用。