第一部分高血压脑卒中患者血清抗α1-肾上腺素受体自身抗体的观察 目的:观察高血压脑卒中患者血浆抗α1-肾上腺素受体自身抗体的情况和该抗体对脑卒中复发及死亡的影响。 方法:收集一年内发生脑卒中(包括：脑梗塞、腔梗、高血压脑出血)的高血压患者和性别、年龄与之相同的正常对照各281例，用ELISA的方法测定血清中抗α1-肾上腺素能受体自身抗体，观察该抗体与卒中类型、卒中时间和血压的关系，并对所有高血压脑卒中患者均随访3.3年，观察脑卒中复发及死亡等事件的发生。 结果:高血压脑卒中患者抗α1-受体自身抗体阳性97例(34.5％)，明显高于正常对照组(19例，6.8％,P＜0.01)；在三种类型脑卒中亚组中，抗α1-肾上腺素受体自身抗体阳性率无明显差别(P＞0.05)，按脑卒中发病时间分组，抗体阳性率也无明显差别；在脑卒中组中，抗体阳性与阴性病人血压水平无显著差异(分别为[145.07±20.70]/[86.11±11.11]mmHg和[148.65±21.37]/[87.68±11.53]mmHg，P＞0.05)。随访结束后抗体阳性及阴性组失访率、血压控制及阿司匹林服用情况无显著差异；抗体阳性组脑卒中复发14例(15.6％)，显著高于抗体阴性组(11例，6.6％，P＜0.05)；在复发脑卒中患者中，抗体阳性与抗体阴性组比较，脑卒中的类型(脑梗塞、腔梗、脑出血)无显著差异。在抗体阳性卒中，各种原因死亡10例(11.1％)，与抗体阴性组(13例，7.8％)无显著差异(P＞0.05)，其中，在抗体阳性组中，因脑卒中死亡6例(6.7％)，而抗体阴性组中因脑卒中死亡7例(4.2％)，亦无显著差异。 结论:抗α1-肾上腺素受体自身抗体与高血压脑卒中相关，该抗体可能并非继发于脑卒中，而是与高血压本身有关，并且可能通过加重脑血管的重塑或动脉粥样硬化而增加脑卒中的复发，可能在高血压脏器损害中发挥重要作用。 第二部分抗α1-肾上腺素受体自身抗体对大鼠心脏重塑的影响及机制 目的:具有激动样活性的抗α1-肾上腺素受体自身抗体可能与去甲肾上腺素一样，在高血压心血管重塑中可能发挥重要作用，本文将观察该抗体对大鼠心脏重塑的影响并探索其可能机制。 方法:用α1-肾上腺素受体胞外第二肽段合成肽免疫wistar大鼠作为据该抗体的模型，设自发性高血压大鼠及正常wistar大鼠为对照；用尾套法监测收缩压及心率，用ELISA法检测抗α1-肾上腺素受体抗体滴度；用亲和层析的方法纯化抗α1-肾上腺素受体抗体，用免疫组化和免疫印迹的方法鉴定其免疫活性，用激光共聚焦显微镜观察该抗体对分离成年大鼠心肌细胞内游离钙离子浓度的影响，以鉴定其激动样活性；用光镜和电镜观察心脏病理变化，并计算心脏/体重比、左心室心肌细胞截面积(CSA)、心肌胶原容积分数(CVF)和心肌血管周围胶原面积与管腔面积比例(PVCA)；用RT-PCR、免疫印迹及免疫组化的方法检测左心室肌组织的c-jun和/或c-fos、α1-肾上腺素受体的表达；用RT-PCR和明胶酶法分别检查心室组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA的表达和活性。 结果:在免疫后2周抗α1-肾上腺素受体抗体滴度开始升高，并在整个实验过程中维持在较高水平；在实验过程中，免疫组血压心率与对照组差异无统计学意义，但均显著低于自发性高血压大鼠组；该抗体可与大鼠心肌细胞表面α1-肾上腺素受体结合，并可升高分离成年大鼠心肌细胞游离钙离子浓度，该作用与去甲肾上腺素一致，可被哌唑嗪阻断，而正常大鼠IgG对大鼠心肌细胞游离钙离子浓度无影响；免疫组心脏/体重比、左心室心肌细胞横截面积(CSA)、心肌胶原容积分数(CVF)和心肌血管周围胶原面积与管腔面积比例(PVCA)分别为3.32±0.25mg/g、231±11μm2、5.40±0.66％和1.89±0.62，均显著高于正常对照组(分别为3.06±0.25mg/g、197±19μm2、3.22±0.15％和0.86±0.17)，但低于自发性高血压大鼠组；电镜结果显示心肌细胞肥大、线粒体增多，心肌间质胶原纤维增多，说明免疫组发生心室重塑;在免疫组中，α1A、B-肾上腺素受体及c-fos的表达与正常对照差异无统计学意义，但α1D-肾上腺素受体表达显著降低(免疫组和正常对照组分别为0.55±0.01和0.88±0.08，P＜0.05)，同时心肌细胞及心肌间质成纤维细胞c-jun蛋白及mRNA的表达显著增加；在免疫组中，心室组织MMP-2mRNA的相对表达较正常对照大鼠增高(免疫组0.71±0.18，正常对照组0.45±0.14，P＜0.05)，免疫组大鼠心室MMP2活性为0.51士0.13，亦显著高于正常对照组(0.28±0.10，P＜0.01)。 结论:抗α1-肾上腺素受体抗体通过长期刺激大鼠心脏α1-肾上腺素受体，可以增加大鼠心肌细胞及心肌间质成纤维细胞c-jun和MMP-2的表达，使心肌细胞肥大、心肌间质胶原沉积而导致心室重塑，该作用与血压水平无关，可能在高血压的脏器损害中发挥重要作用。 第三部分抗α1-肾上腺素受体自身抗体对大鼠血管和肾脏结构的影响 目的:研究抗α1-肾上腺素受体自身抗体对大鼠血管和肾脏结构的影响及其机制。 方法:用α1-肾上腺素受体胞外第二肽段合成肽免疫wistar大鼠作为据该抗体的模型，设自发性高血压大鼠及正常wistar大鼠为对照；用光镜和电镜观察主动脉、肠系膜第三级动脉和肾脏病理变化，并计算血管管壁厚度、管壁/管腔比；用酶消化法培养大鼠平滑肌细胞及用亲和层析的方法纯化抗α1-肾上腺素能受体能抗体，用BrdU掺入法和流式细胞仪检测平滑肌细胞的增殖，用RT-PCR及westernblotting检测血管平滑肌细胞c-jun、c-fos的表达；用免疫组化的方法检测血管壁c-jun的表达和肾脏IgG的沉积。 结果:免疫组主动脉管壁厚度(0.382±0.075mm)、肠系膜三级动脉管壁/管腔比(0.526±0.209)均显著高于正常对照组(分别为0.297±0.009mm，0.379±0.072);电镜结果显示主动脉平滑肌线粒体增多，间质胶原纤维增多；抗α1-肾上腺素能受体抗体可以显著增加VSMC的增殖，并随时间的延长及抗体滴度的增加而增强，并可增加c-junmRNA和蛋白的表达，其作用与NE相似，均显著高于正常对照IgG，并均可被α1-肾上腺素能受体阻滞剂哌唑嗪阻断；在免疫组中，主动脉壁血管平滑肌细胞c-jun蛋白表达亦显著高于正常对照组。免疫组大鼠肾小球毛细血管襻排列不规则，节段性系膜细胞和基质增生，肾小球囊壁增厚、周围间质胶原纤维增生，免疫组化显示肾小球血管攀IgG沉积。 结论:抗α1-肾上腺素受体自身抗体长期刺激可通过增加主动脉平滑肌细胞c-jun的表达及血管平滑肌细胞的增殖，导致主动脉和阻力血管结构的改变，并可促进动脉粥样硬化的形成和导致肾脏损害，可能在高血压脏器损害中发挥作用，而α1-肾上腺素受体拮抗剂可能可对抗其作用。